ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ ........................................4
ВВЕДЕНИЕ ..................................................................................................................................6
Актуальность темы исследования ...........................................................................................6
Цель и зад ач и ...............................................................................................................................9
Науч ная новизна ....................................................................................................................... 10
Науч но - практическая знач имость работы ....................................................................... 11
Поло жения, вынос имые на защиту ...................................................................................... 13
Сте пе нь достовернос ти и апроб ация результатов ............................................................ 14
Пуб ликации ............................................................................................................................... 15
Структура и объем работы ..................................................................................................... 16
Лич ный вклад автора............................................................................................................... 16
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР ................................................................................. 17
1.1 Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) .................................................................. 17
1.2 Био логические мемб раны и их модели...................................................................... 23
1.2.1 Структура б иологических мембран...................................................................... 23
1.2.2 Модельные с истемы б иологических мемб ран ................................................... 25
1.3 Взаимоде йствие полипро те ина Gag ВИЧ с липид ными мембранами................ 28
1.4 Электростатика липид ных мембран ........................................................................... 34
1.5 Биоэлектрохимические методы исследования белок-липид ных
взаимодейс твий......................................................................................................................... 38
1.5.1 Электро кинетические измере ния ζ-поте нциала ................................................ 39
1.5.2 Метод компе нсации внутримембранного по ля (КВП) .................................... 41
1.5.3 Метод локально й фиксации поте нциала «пэтч-кламп»................................... 43
1.6 Липидные нанотруб ки как сенсор изменения свойств мембраны при
адсорб ции молекул .................................................................................................................. 45
ГЛАВА 2. МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ ................................................................................ 49
2.1 Материалы ........................................................................................................................ 49
2.2 Методы .............................................................................................................................. 52
2.2.1 Формирование б ис ло йных липид ных мембран................................................. 52
2.2.2 Метод компе нсации внутримембранного по ля ................................................. 54
3
2.2.3 Измерение ζ-потенциала липосом ........................................................................ 55
2.2.4 Вытягивание липидных нанотрубок .................................................................... 56
2.2.5 Измерение упругих параметров липидного бислоя ......................................... 58
2.2.6 Добавление исследуемых веществ к липидным мембранам .......................... 59
2.2.7 Измерение поверхностного натяжения липидной мембраны ........................ 60
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ ............................................................ 62
3.1 Адсорбция полипротеина Gag ВИЧ на бислойных липидных мембранах ....... 62
3.1.1 Определение плотности поверхностного заряда липидной мембраны ....... 63
3.1.2 Изотермы адсорбции полипротеина Gag ВИЧ на липидных мембранах .... 66
3.2 Воздействие полипротеина Gag ВИЧ на физико-химические свойства липидной мембраны ................................................................................................................ 76
3.2.1 Упругие характеристики липидных мембран .................................................... 77
3.2.2 Адсорбция полипротеина Gag ВИЧ на внутренней поверхности липидных нанотрубок ................................................................................................................................. 79
3.2.3. Адсорбция контрольных веществ на внутренней поверхности НТ............. 88
3.2.4 Адсорбция Gag и магаинина-1 на внешней поверхности НТ ........................ 94
3.2.5 Адсорбция пептида соединения CA-SP1 полипротеина Gag на внутренней и внешней поверхности НТ ................................................................................................... 96
3.2.6 Изменение поверхностного натяжения липидной мембраны при адсорбции полипротеина Gag .................................................................................................................... 98
3.2.7 Теоретическая верификация полученных результатов.................................. 100
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ...................................................................................................................... 107
ВЫВОДЫ ................................................................................................................................. 108
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .................................................................................................... 110
БЛАГОДАРНОСТИ............................................................................................................... 134
