ВВЕДЕНИЕ..............................................................................................................................................7
ГЛАВА 1. КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ, КАК ОСНОВА
ДЛЯ СОЗДАНИЯ АНТИАГРЕГАНТНЫХ СРЕДСТВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)..........................13
1.1. Представление о функциональной активности тромбоцитов и фармакологической коррекции
повышенного тромбогенного потенциала крови. ..............................................................................13
1.2. Направления поиска и создания новых антаигреагнтных средств. ..........................................17
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ............................................................30
ГЛАВА 3. АНТИАГРЕГАНТНЫЕ СВОЙСТВА НОВЫХ КОНДЕНСИРОВАННЫХ
СТРУКТУР.............................................................................................................................................43
3.1. Антиагрегантная активность гетероциклических соединений in vitro. ....................................43
3.1.1. Влияние на агрегацию тромбоцитов моноциклических соединений с гетероатомом
азота........................................................................................................................................................43
3.1.2. Действие на агрегацию тромбоцитов конденсированных азотсодержащих
гетероциклических соединений...........................................................................................................44
3.1.3. Антиагрегантная активность серосодержащих гетероциклических соединений.................46
3.1.4. Влияние на агрегацию тромбоцитов кислородсодержащих гетероциклических
конденсированных соединений. ..........................................................................................................48
3.1.5. Анализ перспективности скафолдов для поиска и создания наиболее активных соединений
in silico. ...................................................................................................................................................49
3.1.6. Заключение. .................................................................................................................................52
3.2. Влияние на процессы агрегации тромбоцитов новых гетероциклических структур in vivo. .53
3.2.1. Антиагрегантная активность и острая токсичность производного ксантина соединения Ф168. 53
3.2.2. Действие на агрегацию тромбоцитов и острая токсичность производного N9-имидазо[3,2-
а]бензимидазола соединения RU-891..................................................................................................56
3.2.3. Антиагрегантная активность и острая токсичность производных 6Н-1,3,4-тиадиазина
соединения L-36. ...................................................................................................................................60
3.2.4. Заключение. .................................................................................................................................63
3.3. Заключение. ....................................................................................................................................63
ГЛАВА 4. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО КСАНТИНА
СОЕДИНЕНИЯ Ф-168 ..........................................................................................................................66
4.1. Влияние соединения Ф-168 на стадии функциональной активности тромбоцитов................66
4.1.1. Действие на процессы адгезии тромбоцитов. ..........................................................................67
3
4.1.2. Влияние на активацию тромбоцитов. .......................................................................................68
4.1.3. Ингибирование секреции АТФ из гранул хранения тромбоцитов.........................................69
4.1.4. Влияние на тромбоксан-простациклиновую ситему. ..............................................................70
4.1.5. Снижение уровня кальция в тромбоцитах................................................................................72
4.1.6. Заключение. .................................................................................................................................75
4.2. Действие соединения Ф-168 на рецепторный ландшафт тромбоцитов....................................75
4.2.1. Влияние на агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ. .........................................................76
4.2.2.Ингибирование функциональной активности тромбоцитов на модели адреналининдуцированной агрегации. .................................................................................................................78
4.2.3. Действие на агрегацию тромбоцитов, индуцированную арахидоновой кислотой...............79
4.2.4. Влияние на агрегацию тромбоцитов, вызванную коллагеном. ..............................................80
4.2.5.Действие на повышение агрегации тромбоцитов, индуцированное агонистом
тромбоксановых рецепторов................................................................................................................80
4.2.6.Действие на процессы агрегации тромбоцитов, индуцированные селективным агонистом
PAR-1 рецепторов. ................................................................................................................................82
4.2.7.Влияние на агрегацию тромбоцитов, вызванную селективным агонистом
гликопротеиновых IIb/IIIa рецепторов................................................................................................83
4.2.8. P2Y12–антагонистическая активность рецепторы тромбоцитов ............................................85
4.2.9. Заключение. .................................................................................................................................86
4.3. Антитромбогенные свойства соединения Ф-168........................................................................86
4.3.1. Антитромботическая активность на модели тромбоза сонной артерии, индуцированного
поверхностной аппликацией 50%-го раствора хлорида железа (III) ...............................................86
4.3.2. Антитромботическая активность на модели тромбоза сонной артерии, индуцированного
электрическим током. ...........................................................................................................................88
4.3.3. Влияние на выживаемость мышей в условиях генерализованного адреналин-коллагенового
тромбоза. ................................................................................................................................................90
4.3.4. Антитромбогенное действие на модели тромбоза нижней полой вены. ...............................93
4.3.5. Антитромботическая активность в условиях экспериментального инфаркта миокарда.....95
4.3.6. Заключение. .................................................................................................................................96
4.4. Влияние соединения Ф-168 на удлинение времени кровотечения ...........................................97
4.5. Оценка влияния соединения Ф-168 на систему гемостаза методом тромбоэластографии. ...98
4.6. Фармакокинетические свойства нового производного ксантина соединения Ф-168. ..........100
4.6.1. Фармакокинетические свойства активной фармацевтической субстанции........................101
4.6.2. Биоэквивалентность инъекционной лекарственной формы. ................................................117
4
4.6.3. Заключение. ...............................................................................................................................118
4.7. Изучение хронической токсичности соединения Ф-168..........................................................118
4.8. Заключение. ..................................................................................................................................123
ГЛАВА 5. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО N9-
ИМИДАЗО[3,2-а]БЕНЗИМИДАЗОЛА СОЕДИНЕНИЯ RU-891...................................................128
5.1. Изучение влияния соединения RU-891 на стадии функциональной активности
тромбоцитов.........................................................................................................................................128
5.1.1. Действие на процессы адгезии тромбоцитов. ........................................................................129
5.1.2. Влияние на активацию тромбоцитов. .....................................................................................130
5.1.3. Ингибирование секреции АТФ из гранул хранения тромбоцитов.......................................131
5.1.4. Снижение уровня Р-селектина в организме крыс. .................................................................132
5.1.5. Влияние на уровень циклооксигеназы-1 в организме крыс..................................................134
5.1.5. Заключение. ...............................................................................................................................137
5.2. Фармакокинетические свойства нового производного бензимидазола RU-891....................137
5.2.1. Фармакокинетические свойства активной фармацевтической субстанции соединения RU891. 137
5.2.2. Биоэквивалентность лекарственной формы для приема внутрь. .........................................152
5.2.3. Заключение. ...............................................................................................................................154
5.3. Антитромбогенные свойства соединения RU-891....................................................................154
5.3.1. Антитромботическая активность на модели тромбоза сонной артерии, индуцированного
поверхностной аппликацией 50%-го раствора хлорида железа (III) и электрическим током.....154
5.3.2. Влияние на выживаемость мышей в условиях генерализованного адреналин-коллагенового
тромбоза. ..............................................................................................................................................160
5.3.3. Антитромбогенное действие на модели тромбоза нижней полой вены..............................165
5.3.4. Антитромботическая активность в условиях экспериментального инфаркта миокарда...166
5.4. Оценка влияния соединения RU-891 на систему гемостаза методом
тромбоэластографии. ..........................................................................................................................169
5.5. Влияние соединения RU-891 на время кровотечения. .............................................................171
5.6. Хроническая токсичность соединения RU-891.........................................................................173
5.7. Расчет и обоснование дозы для проведения I фазы клинических исследований. .................178
5.8. Заключение. ..................................................................................................................................179
ГЛАВА 6. АНТИАГРЕГАНТНЫЕ СВОЙСТВА НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО ТИАДИАЗИНА
СОЕДИНЕНИЯ L-36...........................................................................................................................185
6.1. Влияние соединения L-36 на стадии функциональной активности тромбоцитов. ...............185
5
6.1.1. Действие на адгезивные свойства тромбоцитов. ...................................................................186
6.1.2. Влияние на процессы активации тромбоцитов......................................................................187
6.1.3. Ингибирование секреции АТФ из гранул хранения тромбоцитов.......................................188
6.1.4. Заключение. ...............................................................................................................................191
6.2. Механизм антиагрегантного действия соединения L-36. ........................................................191
6.2.1. Действие на P2Y12 рецепторы тромбоцитов. ..........................................................................192
6.2.2. Антиагрегантная активность на модели агрегации тромбоцитов, индуцированной
агонистом тромбоксановых рецепторов. ..........................................................................................193
6.2.3. Влияние на уровень тромбоксана В2. .....................................................................................194
6.2.4. Влияние на уровень эндотелина-1...........................................................................................195
6.2.5. Влияние на фактор фон Виллебранда. ....................................................................................198
6.2.6. Действие на уровень внутриклеточного кальция. .................................................................201
6.2.7. Заключение. ...............................................................................................................................203
6.3. Анализ in silico механизма антиагрегантного действия соединения L-36. ............................204
6.4. Антитромбогенные свойства соединения L-36.........................................................................210
6.4.1.Антитромбогенная активность на модели тромбоза сонной артерии, индуцированного
поверхностной аппликацией 50%-го раствора хлорида железа (III) и воздействием элетрического
тока. ......................................................................................................................................................211
6.4.2.Выживаемость мышей при моделировании адреналин-коллагенового тромбоза
легких. ..................................................................................................................................................213
6.4.3.Антитромбогенное действие на модели тромбоза нижней полой
вены. .....................................................................................................................................................217
6.4.4. Заключение. ...............................................................................................................................218
6.5. Влияние соединения L-36 на время кровотечения. ..................................................................218
6.6. Консесусная оценка in silico ADMET характеристик соединения L-36 .................................219
6.6.1. ADMET-характеристики токсикологического профиля .......................................................221
6.6.2. ADMET-прогноз фармакокинетических параметров ............................................................223
6.6.3. Заключение ................................................................................................................................225
6.7. Заключение. ..................................................................................................................................225
ГЛАВА 7. АНТИАГРЕГАНТНЫЕ СВОЙСТВА НАИБОЛЕЕ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ Ф168, RU-891 и L-36 В УСЛОВИЯХ ГИПЕРЦИТОКИНЕМИИ ......................................................230
7.1. Молекулярные основы увеличения тромбогенного потенциала крови в условиях
гиперцитокинемии. .............................................................................................................................230
6
7.2. Влияние соединения Ф-168 на функциональную активность тромбоцитов в условиях ЛПСиндуцированной гиперагрегации. .....................................................................................................232
7.3. Влияние соединения RU-891 на функциональную активность тромбоцитов в условиях ЛПСиндуцированной гиперагрегации. .....................................................................................................234
7.4. Влияние соединения L-36 на функциональную активность тромбоцитов в условиях ЛПСиндуцированной гиперагрегации. .....................................................................................................235
7.5. Эффективность фавипиравира, триазавирина, нобазита, ингавирина, арбидола и ремантадина
в условиях ЛПС-идуцированной гиперагрегации. ..........................................................................236
7.6. Заключение. ..................................................................................................................................241
ГЛАВА 8. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ..................................................245
ВЫВОДЫ.............................................................................................................................................263
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.............................................................................................266
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...................................................................................................................269
ПРИЛОЖЕНИЕ 1 ................................................................................................................................304
