СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………….……..5
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ…………………………….………………22
1.1 Плоскоклеточный рак головы и шеи………………………………..…….22
1.1.1.
Молекулярно-биологические
особенности
патогенеза
плоскоклеточного рака головы и шеи……………………….………………..27
1.2. Цитоскелет и белки клеточной подвижности……………………………32
1.2.1 Роль белков клеточной подвижности в патогенезе плоскоклеточного
рака головы и шеи…………………………………..…………………………..33
1.3 Регуляция динамики цитоскелета опухолевой клетки…………….……..42
1.3.1 Транскрипционные факторы и молекулы сигнальных путей в регуляции
цитоскелета опухолевых клеток при развитии плоскоклеточного рака головы
и шеи…………………………………….………………………………………..43
1.3.2 Роль кальпаинов в регуляции цитоскелета опухолевых клеток в
развитии плоскоклеточного рака головы и шеи……….………………..……..49
1.4. Заключение……………………….………………………………………….51
Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ………………..…..53
2.1.1. Клиническая характеристика больных………………………………….53
2.1.2 Материал исследования ……………..……………………...…………..57
2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ……………………………………………..58
2.2.1. Протеомный анализ сыворотки крови больных…………………….…..58
2.2.2. Определение уровня белков клеточной подвижности в сыворотке крови
и ткани методом иммуноферментного анализа……………………….……….59
2.2.3. Определение уровня экспрессии мРНК генов, кодирующих белки
клеточной подвижности и регуляторных молекул……………………..……..60
2.2.4. Определение количества циркулирующих опухолевых клеток и
лейкоцитов содержащих АСБ в системном кровотоке больных ПРГШ…….63
2.2.5. Анализ экспрессии АСБ в опухолевых клетках гортани и в клеточных
компонентах, составляющих микроокружение опухоли………………….….65
2
2.2.6 Статистическая обработка результатов………………………………….68
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ………70
3.1. Протеомный анализ сыворотки крови больных плоскоклеточным раком
головы и шеи……………………………………………………………..………70
3.2. Содержание белков клеточной подвижности в ткани и в сыворотке крови
у больных плоскоклеточным раком головы и шеи……………………………78
3.2.1. Содержание белков клеточной подвижности в сыворотке крови у
больных плоскоклеточным раком головы и шеи, здоровых волонтеров и
пациентов
c
хроническим гиперпластическим ларингитом (high
grade)………………………………………………………………………….…78
3.2.2. Сравнительный анализ сывороточного содержания белков клеточной
подвижности у больных плоскоклеточным раком головы и шеи, здоровых
волонтеров и пациентов с хроническим гиперпластическим ларингитом (high
grade)……………………………………………………………………………87
3.2.3. Зависимость уровня белков клеточной подвижности от основных
клинико-морфологических параметров в группе больных плосколеточным
раком головы и шеи…………………………………………………………….90
3.2.4. Содержание белков клеточной подвижности в сыворотке крови
больных плоскоклеточным раком головы и шеи в зависимости от
прогрессирования
опухолевого
заболевания
после
проведения
противоопухолевой терапии…………………………………………………..112
3.3.
Содержание САР1 и РРМ1В в ткани больных хроническим
гиперпластическим ларингитом (high grade) и плоскоклеточным раком
головы и шеи………………………………………………….………………..115
3.3.1. Содержание белков клеточной подвижности в опухолевой ткани
больных плоскоклеточным раком головы и шеи в зависимости от основных
клинико-морфологических характеристик……………………………….…..119
3.3.2. Содержание белков клеточной подвижности в образцах, взятых у
больных плоскоклеточным раком головы и шеи до лечения в зависимости от
прогрессирования опухолевого заболевания…………………………….…..126
3
3.3.3.
Уровень экспрессии генов, кодирующих белки клеточной
подвижности и регуляторные молекулы в опухолевой ткани больных
плоскоклеточным раком головы и шеи и в эпителии пациентов с
хроническим гиперпластическим ларингитом (high grade)………..…….….128
3.3.4. Оценка взаимосвязи уровня мРНК регуляторных молекул и актин
связывающих белков в тканях опухолей у больных плоскоклеточным раком
головы и шеи…………………………………………………..……….……….143
3.4. Количество содержащих актин-связывающие белки опухолевых клеток,
циркулирующих в системном кровотоке, и в первичной опухоли у больных
плоскоклеточным раком головы и шеи………………………...………….…149.
3.4.1. Анализ циркулирующих опухолевых клеток и общего пула лейкоцитов,
содержащих актин-связывающие белки, в периферической крови больных
плоскоклеточным раком головы и шеи…………………………..…………..150
3.4.2. Анализ экспрессии актин-связывающих белков опухолевыми клетками
и клетками микроокружения опухоли у больных плоскоклеточным раком
головы и шеи………………………………………………….………………157
3.5. Анализ взаимосвязи между показателями белков клеточной подвижности
у больных плоскоклеточным раком головы и шеи……………………….…169
3.5.1.
Анализ взаимосвязей показателей уровня белков клеточной
подвижности в сыворотке крови, опухолевой и морфологически не
измененной ткани у больных плоскоклеточным раком головы и шеи…….169
3.5.2. Анализ вазимосвязей уровня экспрессии генов, кодирующих белки
клеточной подвижности, в опухолевой ткани у больных плоскоклеточным
раком головы и шеи……………………………………………………………176
3.6. Сопоставление исходов заболевания с базовым уровнем белков
клеточной подвижности у больных ПРГШ, а также у пациентов с
хроническим гиперпластическим ларингитом (high grade) ……...…………183
3.6.1. Оценка прогностической значимости белков клеточной подвижности
для определения риска малигнизации у больных ХГЛ (high
grade)……………………………………………………………………………183
4
3.6.2. Определение значимых показателей для построения моделей
прогнозирования прогрессирования плоскоклеточного рака головы и шеи и
поиск референсных величин ……………………..…………………………...186
3.6.3. Значимость определения белков клеточной подвижности в сыворотке
крови больных ПРГШ для прогноза течения заболевания………………….188
3.6.4. Разработка способа оценки риска прогрессирования у больных
плоскоклеточным раком головы и шеи ………………..……………………..193
ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………….…………..199
ВЫВОДЫ………………………………….………………..…………………..219
Практические рекомендации…………….…..………………………………...222
Список литературы …………………………………………………………….224
