ВВЕДЕНИЕ.......................................................................................................................................... 6
Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ................................................................................................... 18
1.1 Эпидемиология эпилепсии ...................................................................................................... 18
1.2 Этиология эпилепсии ............................................................................................................... 20
1.3 Патогенетические механизмы развития эпилепсии.............................................................. 22
1.4 Противоэпилептические препараты (ПЭП) ........................................................................... 39
Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ....................................................... 46
2.1 Экспериментальные животные ............................................................................................... 46
2.2 Используемые вещества........................................................................................................... 46
2.3 Методы, исследования противосудорожной активности ..................................................... 48
2.3.1 Тест максимального электрошока (МЭШ)...................................................................... 48
2.3.2 Тест электрошока с током малой силы............................................................................ 48
2.3.3 Судороги, вызванные коразолом при его подкожном введении................................... 49
2.3.4 Тест пилокарпиновых судорог у мышей ......................................................................... 49
2.4 Электрофизиологические (ЭЭГ) исследования судорожной активности......................... 49
2.5 Модели хронической эпилепсии............................................................................................ 50
2.5.1 Модель фокальной хронической кобальт-индуцированной эпилепсии....................... 50
2.5.2 Модель генетической аудиогенной эпилепсии............................................................... 52
2.5.3 Тест антагонизма с пилокарпином у крыс ...................................................................... 52
2.5.4 Тест антагонизма с пилокарпином с предварительным введением раствора
хлорида лития у крыс (модель рефрактерной эпилепсии)...................................................... 53
2.5.5 Модель эпилептического статуса.................................................................................... 53
2.5.6 Модель первично-генерализованной эпилептической активности, вызванной
бемегридом.................................................................................................................................. 55
2.6 Методики оценки неврологического дефицита и острой токсичности .............................. 55
2.7 Модели церебральных повреждений...................................................................................... 56
2.7.1 Модель глобальной ишемии............................................................................................. 56
2.7.2 Моделирование интрацеребральной посттравматической гематомы,
геморрагического инсульта ....................................................................................................... 60
2.8 Методики изучения противогипоксической активности...................................................... 61
2.8.1 Тест нормобарической гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме ................................ 61
2.8.2 Тест гемической гипоксии ............................................................................................... 61
2.9 Методы оценки нейропсихотропной активности.................................................................. 61
2.9.1 Тест приподнятого крестообразного лабиринта............................................................. 61
3
2.9.2 Тест спонтанного чередования в Y-образном лабиринте .............................................. 62
2.9.3 Тест водного лабиринта Морриса .................................................................................... 63
2.9.4 Тест «Вынужденное плавание по Порсолту».................................................................. 64
2.10 Нейрохимические методы исследования ............................................................................. 65
2.10.1. Метод радиорецепторного связывания с ГАМКA-, ГАМКB-, NMDA-, mGluII- и
D2 - рецепторами мозга.............................................................................................................. 65
2.10.2 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентной
детекцией (ВЭЖХ/ЭД)............................................................................................................... 69
2.10.3 Изучение активности ERK 1/2 киназ и синапсина I..................................................... 70
2.10.4 Гистологический метод исследования........................................................................... 72
2.11 Статистическая обработка результатов................................................................................ 72
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ........................................................................................ 74
Глава 3 Изучение спектра противосудорожных эффектов производных оксимов
бензоилпиридина, дибензофуранона и производных фенилпирролидона в острых
тестах судорог (МЭШ и коразол) и их возможных побочных эффектов в тестах острой
токсичности с оценкой преимуществ перед противоэпилептическими препаратами
первой линии..................................................................................................................................... 74
3.1 Изучение противосудорожных эффектов производных оксимов бензоилпиридина в
тестах максимального электрошока (МЭШ) и антагонизма с коразолом ................................ 74
3.1.1 Исследование противосудорожной активности производных оксимов 3- и 4-
бензоилпиридина в тесте МЭШ ................................................................................................ 74
3.1.2 Исследование противосудорожной активности производных оксимов 3- и 4-
бензоилпиридина в тесте антагонизма с коразолом................................................................ 80
3.2 Изучение противосудорожных эффектов производных оксимов дибензофуранона в
тестах МЭШ и антагонизма с коразолом ..................................................................................... 81
3.2.1 Исследование противосудорожной активности производных оксима
дибензофуранона в тесте антагонизма с МЭШ ....................................................................... 81
3.2.2 Исследование противосудорожной активности производных оксима
дибензофуранона в тесте антагонизма с коразолом................................................................ 84
3.3 Изучение противосудорожных эффектов производных 4-фенилпирролидона в тестах
МЭШ и антагонизма с коразола.................................................................................................... 86
3.3.1 Исследование противосудорожной активности производных 4-фенилпирролидона
в тесте судорог, вызванных МЭШ ............................................................................................ 86
3.3.2 Исследование противосудорожной активности производных 4-фенилпирролидона
в тесте судорог, вызванных коразолом..................................................................................... 88
3.4. Изучение возможных побочных эффектов и острой токсичности лидерных
соединений оксимов бензоилпиридина, дибензофурана и производных 4-
фенилпирролидона ......................................................................................................................... 89
4
3.4.1 Изучение возможных побочных эффектов и острой токсичности лидерных
соединений оксимов бензоилпиридина .................................................................................... 89
3.4.2 Изучение возможных побочных эффектов и острой токсичности лидерных
соединений производных оксима дибензофуранона............................................................... 93
3.4.3 Изучение возможных побочных эффектов и острой токсичности производного 4-
фенилпирролидона, соединения ГИЖ-290............................................................................... 95
Глава 4 Изучение эффектов соединения-лидера из ряда оксимов бензоилпиридина
(ГИЖ-298) на ЭпА мозга крыс на разных этапах формирования Эпи системы, в том
числе развернутого эпилептического статуса и изучение особенностей спектра его
противоэпилептических и нейропсихотропных эффектов в сравнении с вальпроевой
кислотой............................................................................................................................................. 99
4.1 Исследование противосудорожной активности ГИЖ-298 в модели хронической
фокальной (парциальной) эпилепсии, индуцированной кобальтом в сравнении с
вальпроевой кислотой.................................................................................................................... 99
4.2 Влияние соединения ГИЖ-298 в сравнении с вальпроевой кислотой на модели
эпилептического статуса, вызванного нейротоксином гомоцистеина тиолоктоном............. 105
4.3 Изучение противосудорожного действия соединения ГИЖ-298, вальпроевой кислоты
на модели аудиогенных судорог у крыс Крушинского-Молодкиной..................................... 111
4.4 Нейропсихотропные эффекты соединения ГИЖ-298........................................................ 111
Глава 5 Изучение эффектов соединения-лидера из ряда 4-фенилпирролидона (ГИЖ290) на ЭпА мозга на разных этапах формирования Эпи системы и изучение
особенностей спектра его противоэпилептических и нейропсихотропных эффектов в
сравнении с леветирацетамом.................................................................................................... 117
5.1 Исследование влияния ГИЖ-290 в условиях модели хронической фокальной
(парциальной) эпилепсии, индуцированной кобальтом........................................................... 117
5.2 Изучение противосудорожного действия соединения ГИЖ-290 и леветирацетама на
модели генерализованной эпилептической активности, вызванной бемегридом ................. 123
5.3 Изучение противосудорожных эффектов соединения ГИЖ-290 в сравнении с
леветирацетамом и фенотропилом на модели пилокарпиновых судорог............................... 128
5.4 Изучение спектра нейропсихотропной активности ГИЖ-290 в сравнении с
леветирацетамом........................................................................................................................... 130
Глава 6 Расширенное изучение противосудорожных и нейропсихотропных эффектов
соединений-лидеров из ряда оксимов дибензофуранона (ГИЖ-272 и ГИЖ-332)............ 136
6.1 Влияние соединений ГИЖ-332 и ГИЖ-272 на развитие эпилептической системы в
модели кобальт-индуцированной хронической фокальной (парциальной) эпилепсии в
сравнение с леветирацетамом ..................................................................................................... 136
6.2 Исследование влияния ГИЖ-272 и ГИЖ-332 на судороги крыс линии КрушинскогоМолодкиной с генетически детерминированной аудиогенной эпилепсией.......................... 145
6.3 Изучение противогипоксических эффектов ГИЖ-332 и ГИЖ-272 на острых моделях
гипоксии у мышей ........................................................................................................................ 146
5
Глава 7 Исследование нейропротекторного, противоишемического действия
лидерных соединений из ряда оксимов дибензофуранона - ГИЖ-272 и ГИЖ-332 в
моделях церебральных поражений - глобальной ишемии и посттравматической
гематомы мозга крыс .................................................................................................................... 150
7.1 Изучение противоишемических свойств ГИЖ-272 и ГИЖ-332 на модели глобальной
ишемии мозга................................................................................................................................ 150
7.2 Исследование влияния соединения ГИЖ-272 на мозговой кровоток в условиях
глобальной преходящей ишемии ................................................................................................ 156
7.3 Изучение влияния соединения ГИЖ-272 на выживаемость нейронов у крыс с
глобальной ишемией мозга в гистологическом исследовании................................................ 158
7.4 Изучение эффектов ГИЖ-272 и ГИЖ-332 на модели интрацеребральной
посттравматической гематомы.................................................................................................... 162
Глава 8 Особенности пароксизмальной активности и спектральной мощности ЭЭГ
после глобальной ишемии мозга и изучение эффектов соединения ГИЖ-272 и
леветирацетама............................................................................................................................... 169
8.1 Исследование пароксизмальной активности ЭЭГ мозга крыс на разных сроках
постишемического периода и влияние ГИЖ-272 и леветирацетама на эти изменения ........ 169
8.2 Изучение влияния ГИЖ-272 и леветирацетама на изменения спектра мощности ЭЭГ.. 175
Глава 9 Исследование компонентов механизма реализации противосудорожной
активности соединений лидеров ГИЖ- 298, ГИЖ-272, ГИЖ-332 и ГИЖ-290 ................... 185
9.1 Исследование нейрорецептороного механизма противосудорожного действия ГИЖ298 .................................................................................................................................................. 185
9.2 Исследование влияния ГИЖ-298 на активность ERK1/2 киназ и синапсина I у
мышей в тесте судорог, вызванных МЭШ................................................................................. 190
9.3 Исследование нейрохимического механизма противосудорожного действия
соединения ГИЖ-298 в сравнении с топираматом в условиях модели судорог МЭШ......... 195
9.4 Изучение влияния ГИЖ-298 на баланс возбуждающих/тормозных аминокислот в
структурах мозга мышей в модели судорог, вызванных МЭШ............................................... 201
9.5 Изучение нейрорецепторного и нейрохимического механизмов действия соединения
ГИЖ-290 в сравнении с леветирацетамом в условиях литий-пилокарпиновых судорог...... 205
9.6 Изучение нейрохимических механизмов противосудорожного действия соединения
ГИЖ-332 на модели судорог, вызванных МЭШ ....................................................................... 212
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.............................................................................................................................. 217
ВЫВОДЫ......................................................................................................................................... 232
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ.................................................. 234
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ............................................ 235
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ............................................................................................................ 237
