ВВЕДЕНИЕ...................................................................................................................... 5
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.............................................................................................. 13
1.1 Глифосат и его свойства. Применение глифосата............................................ 13
1.1.1 Уровни содержания глифосата в объектах окружающей среды..................... 16
1.1.2 Токсическое действие глифосата для человека и животных........................... 18
1.1.3 Уровень содержания глифосата в кормах для птицы....................................... 23
1.1.4. Методы снижения концентрации токсичных веществ в кормах и других
объектах.......................................................................................................................... 25
1.1.5 Использование пробиотических микроорганизмов в практике
птицеводства.................................................................................................................. 28
1.1.6 Механизмы действия пробиотиков в желудочно-кишечном тракте
птицы ………………………………………………………………………………….31
1.1.7 Синтез метаболитов пробиотическими бактериями и их значение для
организма птицы............................................................................................................ 34
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.................................................... 38
2.1 Исследование содержания глифосата в кормах методом иммуноферментного
анализа............................................................................................................................ 39
2.2 Исследование способности бактерий выживать в присутствии
глифосатсодержащего препарата ................................................................................ 40
2.3 Исследование биодеструкции глифоста бактериями с помощью
метода ИФА ................................................................................................................... 41
2.4 Исследование биодеструкции глифосата бактериями с помощью метода
ВЭЖХ ............................................................................................................................. 42
2.5 Метод определения способности бактерий выживать в условиях желудка и
кишечника, имитируемых in vitro ............................................................................... 44
3
2.6 Методы определения метаболитного профиля бактерий Bacillus megaterium -
4801 и Enterococcus faecium 1-35................................................................................. 45
2.7 Зоотехнический опыт по скармливанию глифосатсодержащего корма и
пробиотика «Пробиоцид-Ультра» цыплятам-бройлерам ......................................... 49
2.8 Определение состава микрофлоры слепых отростков кишечника цыплятбройлеров молекулярно-генетическим методом ....................................................... 53
2.9 Зоотехнический опыт по скармливанию глифосатсодержащего корма и
пробиотика «Целлобактерин®+» курам-несушкам.................................................... 54
3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ .......................................... 59
3.1 Анализ содержания глифосата в образцах кормов растительного
происхождения и в комбикормах ................................................................................ 59
3.2 Определение способности бактерий к выживаемости в присутствии
глифосатсодержащего препарата ................................................................................ 61
3.3 Определение биодеструкции глифосата в инкубируемых смесях методом
ИФА ................................................................................................................................ 69
3.4 Определение биодеструкции глифосата в инкубируемых смесях методом
ВЭЖХ ............................................................................................................................. 70
3.5 Оценка выживаемости бактерий в имитированных условиях желудочнокишечного тракта in vitro ............................................................................................. 74
3.6 Исследование метаболитного профиля пробиотических бактерий Bacillus
megaterium - 4801 и Enterococcus faecium 1-35 .......................................................... 77
3.6.1 Определение витаминов группы B в культуральной жидкости бактерий
Bacillus megaterium – 4801............................................................................................ 78
3.6.2 Определение аминокислот методом УЭЖХ-СФ .............................................. 79
3.6.3 Определение молекулярной массы пептидов методом Малди ....................... 84
3.6.4 Определение метаболитного профиля бактерий методом ГЖХ-МС............. 85
3.7 Оценка эффективности применения пробиотика «Пробиоцид-Ультра» при
кормлении цыплят-бройлеров комбикормом, содержащим глифосат.................... 88
3.8 Микрофлора цыплят-бройлеров ............................................................................ 90
4
3.9 Оценка эффективности применения пробиотика «Целлобактерин®+» при
кормлении кур-несушек комбикормом, содержащим глифосат.............................. 93
3.10 Производственная апробация .............................................................................. 96
ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ ........................................................................ 100
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ............................................ 101
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ........................................................................................................... 107
ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ И ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ
РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ................................................................................................. 110
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ................................................... 111
ПРИЛОЖЕНИЯ........................................................................................................... 135
Приложение А ............................................................................................................. 136
Приложение Б.............................................................................................................. 138
