ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 – ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 – Миелоидны супрессорные клетки
1.1.1 – Общая характеристика миелоидных супрессорных клеток
1.1.2 –Фенотип миелоидных супрессорных клеток
1.1.3 – Механизмы, при помощи которых миелоидные
супрессорные клетки реализуют свою активность
1.1.4 – Роль миелоидных супрессорных клеток в формировании
иммунной толерантности в период беременности
1.2 – Белки, ассоциированные с беременностью
1.2.1 – Белки беременности в формировании иммунной
толерантности
1.2.2 – Альфа-фетопротеин
1.2.3 – Гликоделин
1.2.4 – Хорионический гонадотропин
ГЛАВА 2 − МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 – Объекты исследования
2.2 – Белки и их разведения
2.3 – Методы
С.
5
13
13
13
18
20
25
28
28
28
32
35
40
40
40
41
3
клеток
41
2.3.1 – Фракционирование
периферической крови
мононуклеарных
2.3.2 – Иммуномагнитная сепарация CD33+- и CD11b+- клеток
2.4 – Экспериментальные модели культивирования MDSC in vitro
2.4.1 – Схема культивирования миелоидных супрессорных
клеток из CD33+- клеток периферической крови
2.4.2 – Схема культивирования миелоидных супрессорных
клеток из CD11b+- клеток периферической крови
2.4.3 –
Определение
иммунофенотипа
миелоидных
супрессорных клеток в культурах методом проточной цитометрии
2.5 – Оценка внутриклеточного уровня индоламин-2,3-диоксигеназы
и аргиназы-1
2.6 – Оценка цитокинового профиля в супернатантах культур
миелоидных супрессорных клеток
2.7 – Статистический анализ результатов
ГЛАВА 3 − РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 – Разработка модели получения миелоидных супрессорных клеток
из периферической крови человека в системе in vitro
3.1.1 – Генерация миелоидных супрессорных клеток из CD33+
клеток
3.1.2 – Генерация миелоидных супрессорных клеток из CD11b+
клеток
41
42
42
44
45
47
49
50
51
51
51
52
4
55
3.2 – Роль фетоплацентарных белков в регуляции дифференцировки
миелоидных супрессорных клеток
3.2.1 – Влияние альфа-фетопротеина, гликоделина и
хорионического гонадотропина человека на конверсию выделенных
CD33+-клеток в фенотип MDSC
3.2.2 – Влияние альфа-фетопротеина, гликоделина и
хорионического гонадотропина человека на дифференцировку
CD33+-клеток в субпопуляции MDSC
3.2.3 – Влияние альфа-фетопротеина, гликоделина и
хорионического гонадотропина человека на конверсию выделенных
CD11b+-клеток в фенотип MDSC
3.2.4 – Влияние альфа-фетопротеина, гликоделина и
хорионического гонадотропина человека на дифференцировку
CD11b+-клеток в субпопуляции MDSC
3.2.5 – Оценка внутриклеточного уровня аргиназы-1 и
индоламин-2,3-диоксигеназы в культурах CD11b+-клеток после
культивирования с фетоплацентарными белками
3.3 – Роль фетоплацентарных белков в регуляции продукции
цитокинов клетками, индуцированными в фенотип MDSC
3.3.1 – Анализ цитокинов супернатантов культур CD33+-клеток
3.3.2 – Анализ цитокинов супернатантов культур CD11b+-клеток
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
55
58
60
62
64
66
67
68
74
83
5
85
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение А
Приложение Б
Приложение В
86
89
112
113
117
