СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ................................................................................. 5
ВВЕДЕНИЕ ............................................................................................................. 7
1.1. Стильбены: распространение и значение для растений. ........................ 16
1.2. Биологически активные свойства т-резвератрола и других стильбенов.
.............................................................................................................................. 19
1.4. Биосинтез резвератрола и других стильбенов. ........................................ 43
1.5. Регуляция биосинтеза резвератрола и других стильбенов. .................... 46
1.5.1. Биотические и абиотические стрессы как регуляторы биосинтеза
стильбенов. ......................................................................................................... 46
1.5.2. Регуляция биосинтеза стильбенов с помощью кальциевой сигнальной
системы. .............................................................................................................. 52
1.5.3. Регуляция биосинтеза стильбенов с помощью активных форм
кислорода (АФК). .............................................................................................. 56
1.5.4. Регуляция биосинтеза стильбенов с помощью фитогормонов. .......... 57
1.5.5. Регуляция биосинтеза стильбенов с помощью транскрипционных
факторов. ............................................................................................................. 60
1.5.6. Участие метилирования ДНК в регуляции биосинтеза стильбенов. . 63
1.5.7. Значение предшественников вторичных метаболитов и доступности
питательных веществ для биосинтеза стильбенов. ........................................ 65
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ......................................................................... 68
2.1. Растительный материал и клеточные культуры ...................................... 68
2.2. Генетическая агробактериальная трансформация культур клеток
винограда и растений арабидопсиса ................................................................ 69
2.3. Обработка культур клеток винограда индукторами биосинтеза
стильбенов и другими эффекторами ............................................................... 75
2.4. Обработка листьев растений винограда, хвои ели и арабидопсиса ...... 77
2.5. Выделение нуклеиновых кислот и синтез кДНК .................................... 79
2.6. Количественный и полуколичественный анализ экспрессии генов rol,
PAL, STS, CPK, CML, CCaMK и Myb с помощью ПЦР .................................. 79
2.7. Секвенирование ДНК ................................................................................. 84
2.8. Бисульфитное секвенирование .................................................................. 85
2.9. Определение содержания стильбенов в тканях винограда, ели и сосны
.............................................................................................................................. 86
2.10. Статистический анализ полученных результатов ................................. 86
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ .............................................................. 88
3.1. Накопление стильбенов в тканях дальневосточных растений. ............. 88
3.1.1. Накопление стильбенов в растениях ели аянской P. jezoensis и сосне
корейской P. koraiensis. ..................................................................................... 88
3.1.2. Накопление стильбенов в растениях винограда амурского
V. amurensis. ...................................................................................................... 100
3.1.3. Накопление стильбенов в нетрансгенных каллусах V. amurensis после
обработки УФ-С и при добавлении в питательные среды активаторов и
ингибиторов биосинтеза вторичных метаболитов растений ...................... 107
3.1.4. Накопление стильбенов в трансгенных каллусных культурах
V. amurensis, сверхэкспрессирующих гены rol из агробактерий ................ 112
3.1.5. Экспрессия генов кальциевых сенсоров растений в винограде
амурском V. amurensis после увеличения содержания стильбенов ............ 115
3.1.6. Накопление стильбенов в трансгенных каллусных культурах
винограда амурского V. amurensis, сверхэкспрессирующих гены
кальциевых сенсоров растений ...................................................................... 125
3.1.7. Накопление стильбенов в трансгенных каллусных культурах
винограда амурского V. amurensis, сверхэкспрессирующих гены
транскрипционных факторов ......................................................................... 129
3.1.8. Накопление стильбенов в трансгенных каллусных культурах
винограда амурского V. amurensis, сверхэкспрессирующих гены стильбен
синтаз ................................................................................................................ 131
3.1.9. Накопление стильбенов в трансгенных растениях арабидопсиса,
сверхэкспрессирующих гены стильбен синтаз ............................................. 134
3.1.10. Устойчивость к абиотическим стрессам VaSTS1- и VaSTS7-
трансгенных растений A. thaliana .................................................................. 142
3.1.11. Влияние обработки семян растений A. thaliana предшественниками
фенольных соединений и стильбенами на дальнейшее развитие растений
............................................................................................................................ 145
3.1.12. Устойчивость растений A. thaliana при обработке
предшественниками фенольных соединений и стильбенами ..................... 147
3.1.13. Экспрессия генов метаболизма фитогормонов и защитных генов
арабидопсиса при обработке предшественниками фенольных соединений и
стильбенами ...................................................................................................... 151
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ................................................................................................. 155
ВЫВОДЫ ............................................................................................................ 163
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................... 165
