Введение
1. Обзор литературы 16
1.1. Убиквитин-протеасомная система клеток многоклеточных животных 16
1.2. Основные этапы развития головного мозга, печени и селезёнки крысы 33
1.3. Функционирование протеасом в ЦНС млекопитающих 44
1.4. Функционирование протеасом в иммунной системе млекопитающих 52
1.5. Протеасомы в развитии злокачественных опухолей. 55
1.6. Заключение 57
2. Материалы и методы 60
2.1. Экспериментальные модели беспозвоночных и млекопитающих 60
2.2. Эксперименты по исследованию пулов протеасом в раннем развитии 63
2.3. Эксперименты по исследованию пулов протеасом в развитии донорспецифической иммунологической портальной толерантности 64
2.4. Эксперименты по исследованию пулов протеасом в тканях человека 65
2.5. Получение осветленных гомогенатов 65
2.6. Определение активностей протеасом 66
2.7. Вестерн-блоттинг 67
2.8. Приготовление криостатных срезов органов и последующее иммунофлуоресцентное окрашивание 68
2.9. Выделение мононуклеарных клеток печени 70
2.10. Электрофорез в нативных условиях 70
2.11. Двумерный форез и массспекрометрия 72
2.12. Определение активности ферментов триптофан- и тирозин-гидроксилаз у крыс линии Август 73
2.13. Высокоэффективная жидкостная хроматография с электрохимической детекцией 73
2.14. Статистический анализ 74
3. Результаты 76
3.1. Функционирование протеасом и шаперонов в клетках эволюционно удаленных классов беспозвоночных 76
3.1.1. Особенности функционирования протеасом и шаперонов в целомоцитах полихет при индукции воспаления 76
3.1.2. Функционирование протеасом и шаперонов в клетках Sp насекомых при бакуловирусной инфекции 79
3.1.2.1. Реакция шаперонов семейства HSP/HSC70 на инфекцию вирусом AcMNPV в клетках Sf9 79
3.1.2.2. Особенности функционирования убиквитин-протеасомной системы в клетках Sf9 в ходе инфекции вирусом AcMNPV 86
3.1.2.3. Зависимость репродуктивного цикла вируса AcMNPV от протеолитической активности протеасом и шапероновой активности белков семейства HSP/HSC70 92
3.2. Особенности протеасомных механизмов регуляции гомеостаза протеома клеток ЦНС, печени и селезенке у грызунов 100
3.2.1. Иммунные протеасомы во фронтальной коре, мозжечке и стволе головного мозга крыс линии Вистар в раннем развитии 100
3.2.2. Особенности функционирования иммунных протеасом в селезенке и печени в раннем развитии крыс линии Вистар 110
3.2.3. Содержание иммунных протеасом в отделах мозга и печени плода при индукции воспаления у матери инъекцией липолисахарида (LPS) 135
3.2.4. Протеасомы в головном мозге, печени и селезенке мышей, нокаутных по 02-микроглобулину, составной части молекул ГКГ1 137
3.2.5. Особенности пулов протеасом в головном мозге крыс с метаболическими нарушениями моноаминов 145
3.3. Особенности пулов иммунных протеасом в опухолевых клетках человека 154
4. Обсуждение результатов 164
4.1. Особенности функционирования УПС в клетках эволюционно удалённых классов беспозвоночных 164
4.2. Особенности протеасомных механизмов регуляции гомеостаза протеома клеток ЦНС, печени и селезенке у грызунов 166
4.3. Особенности пулов протеасом в процессе развития опухоли молочной железы человека 180
Заключение 183
Выводы 184
Список публикаций по материалам диссертации 187
Список литературы 193
Приложение 219
