Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1. Болезнь Альцгеймера и медикаментозная терапия 13
1.2. Нейротоксические механизмы действия Р-амилоидного пептида: накопление свободных радикалов, изменение кальциевого гомеостаза и воспалительный ответ 21
1.2.1. Накопление свободных радикалов 23
1.2.2. Изменение кальциевого гомеостаза 25
1.2.3. Воспалительный ответ 26
1.2.4. Активация сигнальных путей 27
1.3. Белки теплового шока и их роль в защите мозга от нейродегенерации 27
1.4. Адаптация к факторам среды и перспективы немедикаментозной терапии и профилактика БА 34
1.4.1. Адаптация к гипоксии 42
1.4.2. Прекондиционирование и адаптация к оксидативному стрессу 45
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 48
2.1. Эксперименты на животных 50
2.1.1. Адаптация к периодической гипобарической гипоксии 51
2.1.2. Моделирование нейродегенеративного процесса 52
2.1.3. Поведенческие тесты 53
2.1.3.1.Условный рефлекс пассивного избегания (УРПИ) 53
2.1.3.2. Тест экстраполяционного избавления (ТЭИ) 55
2.1.3.3. Тест "открытое поле" 55
2.1.4. Забор и хранение тканей отделов мозга 56
2.1.5.Определение содержания вторичных продуктов перекисного окисления липидов в гомогенатах структур головного мозга крыс 56
2.2. Эксперименты на культуре клеток 58
2,2.1. Процедура выращивания и пересадки клеток 58
2.2.2.Повреждение клеток оксидативным стрессом и измерение их метаболической активности (МТТ-тест) 59
2.2.3. Адаптация клеток к неповреждающим воздействиям оксидативного стресса 60
2.2.4. Оценка содержания белков теплового шока (Вестерн-блот анализ) 61
2.2.5. Ингибирование синтеза белков теплового шока 63
2.3. Статистическая обработка данных 64
ГЛАВА 3. Результаты исследований и их обсуждение 65
3.1. Адаптация к гипоксии предупреждает нарушение когнитивных функций, вызванное введением 3-амилоида, у крыс линии Вистар 65
3.2. Адаптация к гипоксии ограничивает оксидативный стресс в гиппокампе, вызванный введением Р-амилоида, у крыс линии Вистар 69
3.3. Различия в устойчивости крыс Вистар и Август к нейродегенеративному повреждению мозга 70
3.4. Прекондиционирование и адаптация к Н2О2 защищают изолированные нейроны от гибели, вызванной последующим воздействием оксидативного стресса 74
3.5. Белки теплового шока вовлечены в адаптационную защиту нейронов от оксидативного повреждения 94
3.6. Ингибитор синтеза белков теплового шока, кверцетин, устраняет защитный эффект адаптации нейронов к Н2О2 98
3.7. Обсуждение результатов 100
Выводы 112
Литература 114
