Введение
Глава 1 Свойства микотоксинов и методы их определения 13
1.1 Микотоксины и их свойства 13
1.1.1 Афлатоксины 14
1.1.2 Охратоксин А 15
1.1.3 Зеараленон 15
1.1.4 Патулин 16
1.2 Методы определения МИКОТОКСИНОВ 18
1.2.1 Хроматографические методы определения микотоксинов 18
1.2.2 Иммунохимические методы определения МИКОТОКСИНОВ 26
1.2.3 БИОСЄНСОРЬІ ДЛЯ определения МИКОТОКСИНОВ 28
1.2.3.1 Ферментные сенсоры 28
1.2.3.2 Иммуносенсоры для определения МИКОТОКСИНОВ 32
1.2.3.3 Аптасенсоры для определения микотоксинов 36
1.2.4. Свойства некоторых ферментов и биосенсоры на их основе 38
1.2.4.1. Холинэстераза и биосенсоры на ее основе 38
1.2.4.2 L-цистеиндесуфгидраза и ее использование в биосенсорах 42
1.2.4.3. Щелочная фосфатаза и биосенсоры на ее основе 43
1.2.4.4 Тирозиназа и биосенсоры на ее основе 46
Глава 2 Нанотрубки как модифицирующий материал поверхности электродов 51
2.1. Свойства углеродных нанотрубок 51
2.2. Функционализация углеродных нанотрубок 52
2.3. Ферментные электроды на основе углеродных нанотрубок 55
Глава 3. Постановка задачи, аппаратура, объекты исследования и условия эксперимента 58
3.1. Постановка задачи 58
3.2 Аппаратура и объекты исследования 60
3.3. Реактивы и приготовление растворов 61
3.4. Получение гомогенатов из растительных материалов 63
3.4.1 Получение гомогената из зерновой культуры 63
3.4.2 Получение гомогената из грибов и бананов з
3.5. Подготовка углеродных нанотрубок для модификации электродов 64
3.6. Изготовление амперометрических биосенсоров на основеиммобилизованных ферментов 65
3.7. Обработка экспериментальных данных 67
3.7.1. Расчет кинетических параметров ферментативных реакций 67
3.7.2. Определение констант связывания иммунного комплекса антиген-антитело 69
3.7.3. Определение процента перекрестного реагирования 70
Глава 4. Аналитические возможности амперометрических биосенсоров в определении некоторых микотоксинов 71
4.1. Аналитические возможности холинэстеразного биосенсора в определении микотоксинов 71
4.1.1. Природа формирования аналитического сигнала холинэстеразного биосенсора 71
4.1.2. Изучение влияния афлатоксина В1, зеараленона и охратоксина А на каталитическую активность иммобилизованной холинэстеразы 72
4.1.3. Холинэстеразные биосенсоры на основе модифицированных углеродными нанотрубками электродов 75
4.2. Оценка возможности использования цистеиндесульфгидразы как ферментного препарата в биосенсорах для определении микотоксинов 83
4.2.1. Природа формирования аналитического сигнала 84
4.2.2. Влияние афлатоксина В1, охратоксина А и зеараленона на каталитическую активность иммобилизованной цистеиндесульфгидразы 85
4.2.2. Влияние микотоксинов на модифицированные МУНТ цистеиндесульфгидразные сенсоры 88
4.3. Оценка аналитических возможностей биосенсоров на основе иммобилизованной щелочной фосфатазы в определении микотоксинов 91
4.3.1. Природа формирования аналитического сигнала 91
4.3.2. Влияние патулина, афлатоксина В1, зеараленона и охратоксина А на иммобилизованную щелочную фосфатазу 93
4.3.3 Влияние МУНТ на аналитические характеристики биосенсора на основе щелочной фосфатазы 96
4.4. Биосенсоры на основе тирозиназы 101
4.4.1. Природа формирования аналитического сигнала тирозиназного биосенсора 101
4.4.2. Изучение влияния зеараленона на каталитическую активность иммобилизованной тирозиназы 104
4.4.2.1. Действие зеараленона на иммобилизованную тирозиназу 104
4.4.2.2 Модификация электродов композитом - МУНТ - хитозан: влияние на аналитические возможности 104
4.4.2.3. Модификация электродов композитом - ОУНТ - хитозан: влияние на аналитические возможности 105
4.5 Кинетические параметры реакций ферментативного превращения субстратов в присутствии микотоксинов 107
4.6. Разработка иммуноферментного сенсора для определения афлатоксина В1 111
4.6.1. Аналитические возможности иммуноферментного сенсора 112
4.6.2 Аналитические возможности иммуноферментного сенсора, модифицированного углеродными нанотрубками для определения афлатоксина В1 115
Глава 5 Определение микотоксинов в пищевых продуктах 116
5.1. Определение АФВ1 и зеараленона в зерновых культурах 117
5.2. Определение патулина в яблоках 121
Заключение 122
Выводы 126
Литература 128
