Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 26
1.1. Иксодовые клещи – переносчики трансмиссивных заболеваний 26
1.2. Особенности функционирования слюнных желез иксодовых клещей 27
1.3. Морфологические изменения в месте питания клещей 28
1.4. Влияние компонентов слюны клещей на развитие иммунных реакций хозяина 29
1.5. Специфическая противоклещевая резистентность 33
1.6. Другие факторы, влияющие на противоклещевой иммунитет 35
1.7. Перспективы создания антиклещевых вакцин 36
1.8. Особенности взаимодействия клещ-возбудитель-хозяин 38
1.8.1. Адаптации возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов в организме клеща 38
1.8.2. Адаптации возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов в организме теплокровного хозяина 39
1.9. Borrelia burgdorferi и развитие инфекционного процесса 41
1.10. Использование иммунологических методов в исследованиях иммунопатогенеза иксодовых клещевых боррелиозов... 44
1.11. Диагностика иксодовых клещевых боррелиозов 46
1.11.1. Актуальность разработки иммунодиагностического клеточного теста 48
1.12. Заключение по обзору литературы 49
Собственные исследования 50
Результаты и обсуждение 50
ГЛАВА 2. Анализ иммуномодулирующего действия экстракта слюнных желез иксодовых клещей ixodes persulcatus на иммунокомпетентные клетки мышей линии BALB/С 50
2.1. Характеристика экстракта слюнных желез. 50
2.2. Влияние экстракта слюнных желез I. persulcatus на жизнеспособность иммунокомпетентных клеток... 52
2.3. Оценка in vitro влияния экстракта слюнных желез на макрофаги мышей 54
2.4. Оценка in vitro воздействия экстракта слюнных желез I. persulcatus на клетки адаптивного иммунитета интактных мышей 56
ГЛАВА 3. Формирование у мышей устойчивости к заражению боррелиозом после повторных напусков клещей. 62
3.1. Оценка in vitro формирования у мышей иммунного ответа на экстракт слюнных желез 62
3.2. Оценка in vivo антиклещевого иммунитета у мышей . 67
3.3. Устойчивость мышей к заражению возбудителями боррелиоза через укус клеща 69
ГЛАВА 4. Получение рекомбинантного белка клещей i. persulcatus salp15 и исследование его иммуногенных, цитотоксических и протективных свойств ... 72
4.1. Получение и характеристика по чистоте рекомбинантного белка Salp15. 72
4.2. Изменение активности генов слюнных желез I. persulcatus в зависимости от стадии питания клещей 74
4.3. Исследование in vitro иммуногенных и цитотоксических свойств рекомбинантного белка Salp15 клещей I. persulcatus . 76
4.4. Опсонизация рекомбинантным белком Salp15 I. persulcatus поверхности боррелий 77
4.5. Оценка протективного действия анти-Salp15-антител в модели инфицирования боррелиями через зараженных клещей 79
ГЛАВА 5. Использование антигенов боррелий в клеточных тестах для определения заражения боррелиозом мышей на ранней стадии болезни 81
5.1. Получение и характеристика по чистоте рекомбинантных белков DbpA и BBK32 81
5.2. Определение специфической активации лимфоцитов антигенами боррелий 83
5.3. Определение цитокинового профиля инфицированных мышей 86
5.4. Определение изменений в уровне синтеза цитокинов Т-хелперами, при их специфической активации антигенами боррелий 87
Заключение. 90
Список принятых сокращений, условных обозначений, символов, единиц и терминов 93
Список литературы 96
