Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1 Общие сведения о геморрагической лихорадке с почечным синдромом
1.2 Молекулярная биология, филогения и зоогеография хантавирусов
1.2.1 Зоогеография хантавирусов 15
1.2.2 Особенности организации генома хантавирусов 20
1.2.3 Синтез вирусной РНК и созревание вирионов 29
1.2.4 Функции вирусных белков 35
1.3 Вакцины 38
1.3.1. Генно-инженерные вакцины 38
1.3.2 ДНК-вакцины. Особенности генетической иммунизации 38
1.3.3 Преимущества ДНК-вакцин и возможные ограничения в их применении
1.3.4 Вакцины против геморрагической лихорадки с почечным синдромом.
Глава 2 Объект и методы исследований 53
2.1 Краткая характеристика объектов исследований 53
2.2 Выделение и очистка тотальной РНК из образцов легочной ткани рыжей nojiQBKii.(Clethrionomys glareolus) 54
2.3 Выделение и очистка суммарной РНК из образцов крови больных, заболевших ГЛПС. 55
2.4 Выделение и очистка плазмидной ДНК 56
2.5 Выделение плазмидной ДНК методом мягкого лизиса 58
2.6 Удаление РНК из препаратов плазмидной ДНК. 59
2.7 Расщепление ДНК рестрикционными эндонуклеазами
2.8 Аналитический гель-электрофорез ДНК в неденатурирующих условиях 60
2.9 Препаративный гель-электрофорез ДНК в неденатуриругощих условиях 62
2.10 Синтез кДНК 62
2.11 Полимеразная цепная реакция 62
2.12 Элюция ДНК из агарозных гелей 63
2.13 Концентрирование ДНК бутанолом 65
2.14 Приготовление компетентных клеток 65
2.15 Приготовление вектора для клонирования 66
2.16 Секвенирование ДНК 67
2.17 Цитирование вектора и фрагмента ДНК
2.18 Трансформация компетентных клеток Е.соИ плазмидной ДНК 67
2.19 Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей 68
2.20 Индукция lac промотора 70
2.21 Электрофорез полипептидов Е. coli 70
2.22 Твердофазный иммуноферментный анализ 72
2.23 Реактивы и материалы 72
Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение 75
Заключение 106
Выводы 106
Список литературы 108
