Введение
Глава 1. Основы взаимодействия партнеров в симбиотических ассоциациях 8
1.1. Природа лишайникового симбиоза 8
1.2. Биохимические системы регуляции взаимодействия между лишайниковыми симбионтами 13
1.3. Взаимодействия в системе «хозяин-патоген» 16
Глава 2. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах 19
2.1. Молекулярные механизмы генерации активированных кислородных метаболитов 19
2.2. Общая характеристика основных форм активированных кислородных метаболитов 21
Глава 3. Деструктивные процессы, индуцированные активированными кислородными метаболитами 24
3.1. Модификация ДНК 24
3.2. Окисление белков 24
3.3. Окисление хлорофиллов 24
3.4. Окисление липидов 25
Глава 4. Особенности состава мембранных липидов лишайников 33
4.1. Состав индивидуальных фосфолипидов 33
4.2. Состав индивидуальных гликолипидов 35
Глава 5. Системы защиты от окислительных повреждений 37
5.1. Низкомолекулярные соединения 38
5.1.1. Токоферолы 38
5.1.2. Другие фенольные соединения 43
5.1.3. Глутатион 45
5.1.4. Каротиноиды 46
5.2. Высокомолекулярные соединения 51
5.2.1. Супероксиддисмутазы 51
5.2.2. Пероксидазы 54
5.2.3. Каталаза 58
Материалы и методы исследования 60
Глава 1. Объекты исследования и постановка эксперимента 60
1.1. Объекты исследования 60
1.2. Постановка эксперимента 60
1.3. Изоляция лишайниковых симбионтов 62
Глава 2. Методы исследования 64
2.1. Анализ липидов и продуктов их окисления 64
2.1.1. Экстракция общих липидов 64
2.1.2. Выделение фракции гликолипидов, фосфолипидов и ДГТС 64
2.1.3. Разделение индивидуальных классов полярных липидов 65
2.1.4. Количественное определение фосфолипидов 66
2.1.5. Количественное определение гликолипидов 67
2.1.6. Количественное определение ДГТС 69
2.1.7. Определение относительного количества гидроперекисей жирных кислот в составе полярных липидов 69
2.1.8. Получение метиловых эфиров жирных кислот 71
2.1.9. Газо-жидкостная хроматография метиловых эфиров жирных кислот 71
2.2. Анализ токбферолов 73
2.2.1. Экстракция токоферола 73
2.2.2. Выделение фракции токоферола 73
2.2.3. Количественное определение токоферола 74
2.3. Анализ каротиноидов 74
2.3.1. Экстракция каротиноидов 74
2.3.2. Разделение каротиноидов 75
2.3.3. Количественное определение каротиноидов 77
2.4. Определение активности ферментов антиокислительной защиты 79
2.4.1. Приготовление ферментной вытяжки 79
2.4.2. Определение активности супероксиддисмутазы 79
2.4.3. Определение активности гваяколпероксидазы 80
2.4.4. Определение количества белка 80
2.5. Определение антиокислительной активности лишайниковых веществ в опытах in vitro 81
2.6. Статистическая обработка результатов 82
Результаты и обсуждение 84
Глава 1. Результаты разделения симбионтов лишайников. Получение фракций, обогащенных грибами, водорослями и цианобактериями 84
Глава 2. Мембранные липиды лишайниковых симбионтов в норме и в условиях окислительного стресса 92
2.1. Состав индивидуальных фосфолипидов 92
2.2. Изменения в составе индивидуальных фосфолипидов лишайниковых симбионтов в ходе АКМ-индуцированного окислительного стресса 97
2.3. Состав жирных кислот фосфолипидов 105
2.4. Действие АКМ на состав жирных кислот фосфолипидов 112
2.5. Состав индивидуальных гликолипидов лишайниковых фотобионтов 123
2.6. Изменения в составе индивидуальных гликолипидов в ходе АКМ-индуцированного окислительного стресса 124
Глава 3. Антиокислительная система низкомолекулярных веществ липидной фазы у симбионтов лишайников 130
3.1. Каротиноиды лишайниковых симбионтов в норме и в условиях окислительного стресса 130
3.1.1. Состав каротиноидов 130
3.1.2. Изменение содержания каротиноидов как одна из реакций адаптации к воздействию АКМ 132
3.2. Содержание токоферолов у лишайниковых симбионтов в
норме и в условиях окислительного стресса 138
Глава 4. Ферменты антиокислительной защиты лишайниковых симбионтов в норме и в условиях действия АКМ 142
4.1. Супероксиддисмутаза 142
4.2. Гваяколпероксидаза 146
Глава 5. Антиокислительная активность лишайниковых веществ 151
Заключение 159
Выводы 163
Литература
