Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 10
1.1. Аутоантитела к ДНК 10
1.1.1. Полиреактивность ААТ к ДНК 10
1.1.2. Происхождение ААТ к ДНК 12
1.1.3. Каталитическая активность ААТ к ДНК 15
1.2. Взаимосвязь вирусных инфекций и аутоиммунитета 17
1.2.1. Индукция аутоиммунных процессов при вирусных инфекциях 17
1.2.2. Аутоантитела к ДНК при вирусных инфекциях 24
1.2.3. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) (краткая характеристика) 26
1.2.4. Изменения в иммунной системе при ГЛПС 28
1.2.5. Циркулирующие иммунные комплексы при ГЛПС 29
1.3. Участие иммуноглобулинов М (IgM) в регуляции иммунного ответа 32
1.3.1. Функциональные свойства IgM 32
1.3.2. Роль IgM в регуляции иммунного ответа на вирусные Инфекции 33
1.3.3. Роль IgM в регуляции аутоиммунного процесса 35
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований 38
2.1. Оборудование и реактивы 38
2.2. Объект исследования 40
2.3. Определение аутоантител к ДНК методом ИФА 40
2.3.1. Подбор оптимальной концентрации конъюгата 42
2.3.2. Статистическая обработка результатов 42
2.4. Выделение циркулирующих иммунных комплексов 44
2.5. Определение ДНК- абзимной активности в сыворотке крови 44
2.6. Выделение и очистка IgG и IgM иммуноглобулинов сыворотки крови 45
2.6.1 Осаждение иммуноглобулинов сульфатом аммония 45
9 2.6.2 .Обессоливание СА-фракции методом гель-фильтрации 46
2.6.3. Хроматография на колонке с QAE-сефадексом А-50 47
2.6.4 Аффинная хроматография ААТ к ДНК на нДНК и дДНК-целлюлозе 47
2.6.5 Выделение IgM ААТ к ДНК 48
ГЛАВА 3. Результаты экспериментов и их обсуждение 49
3.1. Содержание ААТ к нативной и денатурированной ДНК в сыворотке крови больных ГЛПС и здоровых лиц 49
3.1.1. Содержание IgG ААТ к ДНК в сыворотке крови при ГЛПС 49
3.1.2. Содержание IgM ААТ к ДНК в сыворотке крови при ГЛПС 59
3.1.3. Зависимость содержания IgG ААТ к ДНК от уровня содержания IgM 67
3.2. Характеристика ЦИК в сыворотке крови больных и здоровых лиц 71
3.2.1. Содержание ЦИК в сыворотке крови больных ГЛПС 72
3.2.2. Определение ААТ к ДНК в составе ЦИК 74
3.2.3. Зависимость содержания ААТ к ДНК в ЦИК от уровня их содержания в сыворотке крови больных ГЛПС 77
3.3. ДНК-абзимная активность в сыворотке крови больных ГЛПС 79
3.3.1. Определение абзимной активности в сыворотке крови 79
3.4. Выделение и характеристика IgG ААТ к ДНК 84
3.4.1. Определение удельной активности IgG ААТ к ДНК 89
3.5. Выделение и характеристика IgM ААТ к ДНК 90
Заключение 94
Выводы 97
Литература 99
