Введение
ГЛАВА 1. Материалы и методы 53
Реагенты .53
Оборудование 53
Объекты исследования 53
Получение УФ-спектра убидекаренона 54
Получение УФ-спектра CoQ10H2 .54
Приготовление стандартных растворов 54
Приготовление модельных смесей стандартных разведений убидекаренона (TCoQ10) с плазмой крови крыс 55
Пробоподготовка тканей органов крыс 57
Гомогенизация биоматериала 57
Экстракция 58
Методика ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектированием .58
Методика ВЭЖХ с электрохимическим детектированием .59
Валидация методик ВЭЖХ-ЭХ и ВЭЖХ-СФ (max=275 нм) .60
Фармакокинетические исследования убидекаренона 62
Введение per os 62
Внутривенное введение 63
Внутримышечное введение .64
Расчет фармакокинетических параметров, абсолютной и относительной биодоступности при различных путях введения 65
Методики определения CoQ10 в клинических исследованиях 66
ГЛАВА 2. Разработка и сравнительный анализ методик определения убидекаренона в субстанции и плазме крови, в окисленной и восстановленной формах, с помощью ВЭЖХ со спектрофотометрическим и электрохимическим детектированием 68
2.1 Сравнительный анализ методик определения убидекаренона в субстанции методом ВЭЖХ-СФ при =275 нм и 290 нм 68
2.2 Разработка методики ВЭЖХ-СФ при =290 нм для убихинола и методики ВЭЖХ-СФ с переключением детектора с 290 на 275 нм для определения убихинона и убихинола в одной пробе 71
2.3 Сопоставление методик ВЭЖХ-СФ и ВЭЖХ-ЭХ для определения убидекаренона в модельных смесях с плазмой крови 76
ГЛАВА 3. Оптимизация методик пробоподготовки и определения убихинона и убихинола в биоматериале .79
3.1 ВЭЖХ-СФ и ВЭЖХ-ЭХ определение убихинона и убихинола в плазме крови крыс 79
3.2 ВЭЖХ-СФ и ВЭЖХ-ЭХ определение убихинона и убихинола в плазме крови человека: селективность и преимущества 82
3.3 Разработка режимов гомогенизации биоматериала с помощью ультразвукового гомогенизатора 86
3.4 Выбор метода детектирования CoQ10 в экстрактах биоматериала 92
3.5 Валидация методик ВЭЖХ-ЭХ и ВЭЖХ-СФ для количественного определения убидекаренона 94
ГЛАВА 4. Изучение фармакокинетики убидекаренона при различных путях введения 99
4.1 Фармакокинетика убидекаренона в таблетках .100
4.2 Фармакокинетика убидекаренона, распределение по органам и окислительно-восстановительный статус при внутривенном введении препарата Кудесан .108
4.3 Фармакокинетика убидекаренона и распределение по органам при внутримышечном введении препарата Кудесан 119
4.4 Расчет фармакокинетических параметров, абсолютной и относительной биодоступности убидекаренона .125
ГЛАВА 5. Применение методики определения CoQ10 в клинических исследованиях .129
5.1 Определение содержания CoQ10, как возможного маркера окислительного стресса, в плазме крови и соскобах эндометрия женщин с бесплодием различного генеза. 129
5.2 Оценка эффективности трехмесячного приема убидекаренона в составе препарата Кудесан при хронической сердечной недостаточности II-III классов по содержанию CoQ10 в плазме крови и функциональным параметрам пациентов 131
III. Заключение .133
IV. Выводы .134
V. Список литературы
