Введение
ГЛАВА 1. Биохимическая адаптация гидробионтов к токсическому воздействию и другим факторам среды (обзор литературы) 21
1.1. Молекулярные факторы адаптации. Металлотионеины и другие стресс-белки 23
1.2. Метаболические факторы адаптации 35
1.2.1. Реакции свободного окисления 36
1.2.1.1. Ферментативная детоксикация ксенобиотиков 41
1.2.1.2. Антиоксидантная защита .і 1
1.2.1.3. Биомаркеры окислительно-восстановительных процессов в экологическом мониторинге природных водоемов
1.2.2. Адаптивная динамика основных путей метаболизма 69
1.2.3. Биогенные вещества и специализированные защитные белки в качестве факторов метаболической адаптации 73
1.3. Клеточная адаптация и её биохимические маркеры 82
1.3.1. Апоптоз — запрограммированная гибель клеток 84
1.3.2. Аутолиз и некроз 96
1.4. Стресс и его общебиологическая природа 108
1.4.1. Основные биохимические маркеры стресса 109
1.4.2. Развитие стресс-реакции. Неспецифическая и специфическая адаптация 113
ГЛАВА 2. Материалы и методы 119
2.1. Материалы 119
2.1.1. Особенности биологии подопытных животных 119
2.1.2. Сбор и содержание животных в лаборатории. Постановка токсикологических экспериментов 130
2.2. Методы 132
2.2.1. Количественное определение активности ферментов 132
2.2.2. Энзимэлектрофорез множественных форм ферментов в полиакриламидном геле 139
2.2.3. Изоэлектрическое фокусирование множественных форм ферментов 141
2.2.4. Определение субклеточной локализации множественных форм ферментов 1чЗ
2.2.5. Качественное и количественное определение сорбита 143
ГЛАВА 3. Суммарная активность ферментов в остром токсикологическом эксперименте 145
3.1. Методическая основа и проблемы постановки токсикологических экспериментов 146
3.1.1. Верификация результатов, полученных с объединённой пробой 150
3.1.2. Групповая изменчивость и репрезентативные группы 157
3.2. Изучение динамики суммарной активности ферментов в остром токсикологическом эксперименте 161
3.2.1. Изменение активности ферментов как следствие интоксикации организма 162
3.2.2. Колебательная динамика активности ферментов в процессе адаптации 165 ГЛАВА 4. Изменение состава множественных форм гидролитических ферментов при интоксикации гидробионтов 187
4.1. Молекулярная гетерогенность ферментов в норме 188
4.1.1. Процедура разделения и характеристики множественных форм исследованных ферментов 188
4.1.2. Ферменты или множественные формы? 194
4.2. Функциональные и патологические изменения состава множественных форм ферментов 199
4.2.1. Множественные формы ферментов как инструменты метаболической адаптации и маркеры загрязнённости природных вод 205
4.2.2. Множественные формы ферментов как факторы специализации тканей, органов и межвидовой дифференциации 210
ГЛАВА 5. Комплекс кислых фосфатаз живородки речной 214
5.1. Молекулярная гетерогенность и субклеточная локализация 215
5.1.1. Суммарная активность и состав множественных форм 215
5.1.2. Тканевая специфичность и субклеточная локализация 225
5.2. Физико-химические свойства и функции кислых фосфатаз 233
5.2.1. Очистка ферментов, их зависимость от катионов металлов 233
5.2.2. Субстратная специфичность и метаболические функции 237
5.3. Реакция комплекса кислых фосфатаз на токсическое воздействие 240
5.3.1. Опыты in vitro 240
5.3.2. Опыты in vivo 244
5.3.2.1. Динамика суммарной активности комплекса кислых фосфатаз 245
5.3.2.2. Изменения состава множественных форм кислых фосфатаз 253
ГЛАВА 6. Обмен побочных метаболитов в состоянии стресса 263
6.1. Побочные метаболиты живородки речной 267
6.1.1. Сезонная динамика накопления сорбита 270
6.1.2. Стресс-индуцированная динамика накопления сорбита 271
6.2. Динамика активности сопутствующих ферментов 274
6.2.1. Превращение побочных метаболитов в состоянии холодового и токсического воздействия 275
6.2.2. Координация факторов срочной и устойчивой адаптации. Структурный след 284
ГЛАВА 7. Биохимическое тестирование стоков и индикация качества природной воды 291
7.1. Лабораторный токсикологический эксперимент 292
7.2. Исследования в природном водоёме
7.2.1. Биологическая индикация качества воды ЗС1
7.2.2. Эксперимент в природных условиях (биотестирование путём переселения) 320 заключение 329
Выводы 333
Список литературы
