Введение
1. Обзор литературы 12
1.1. Краткая характеристика цирковирусных инфекции 12
1.2. Таксономическое положение цнрковирусов свиней 14
1.3. Морфологические и структурные особенности цнрковирусов 15
1.4. Физико-химические свойства цнрковирусов 15
1.5. Молскулярно-биологические особенности строения ЦВС 16
1.6. Генетическая вариабельность геномов цнрковирусов свиней 19
1.7. Механизм репродукции цнрковирусов свиней 20
1.7.1. Чувствительность клеток к заражению ЦВС-2 в условиях in vivo 21
1.7.2. Культивирование ЦВС-2 in vitro 23
1.8. Распространение ЦВС-1 и ЦВС-2 24
1.9. Цнрковирус человека 27
1.10. Синдром мультисистемного истощения отьёмышей 30
1.11. Патологоанатомичсские изменения при СМИО 31
1.12. Дерматит и синдром нефропатии (ДСНП) 33
1.13. Заболевания, ассоциируемые с цирковирусом свиней 2 типа 35
1.13.1. Инфекционный врожденный (конгенитальный) тремор 35
1.13.2. Нарушения репродуктивной функции 36
1.13.3. Комплекс респираторной патологии свиней 38
1.13.4. Смешанные инфекции 39
1.14. Методы диагностики цирковирусной инфекции свиней.. 40
1.15. Специфическая профилактика и лечение 43
Заключение по обзору литературы 44
2.Собственные исследования 47
2.1.Материалы и методы 47
2.1.1. Материалы 47
2.1.1.1. Вирусы и бактерии 47
2.1.1.2. Культуры клеток 47
2.1.1.3. Патологический материал 48
2.1.1.4. Сыворотки 48
2.1.1.5. Реактивы и растворы 48
2.1.1.6. Оборудование 50
2.1.2. Методы 51
2.1.2.1.Имунноферментный анализ 51
2.1.2.2. Выделение ДНК 51
2.1.2.3. Полимеразная цепная реакция 52
2.1.2.4. Гистологические исследования 53
2.1.2.5. Культивирование культур клеток 53
2.1.2.6. Концентрирование и очистка вируссодержащих суспензий 54
2.1.2.7. Методы электронной микроскопии 55
2.1.2.8. Культивирование вируса в культурах клеток 56
2.1.2.9. Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени 57
2.1.2.10. Нуклеотидное секвенирование 58
2.1.2.11. Программное обеспечение 59
2.1.2.12. Статистическая обработка данных 59
3. Результаты исследований 60
3.1. Серологические исследования в хозяйствах Российской Федерации 60
3.2. Изучение патоморфологических изменений у поросят при цирковирусной инфекции 62
З.З.Макроскопичсскпс изменения 63
3.4. Гистологические изменения 67
3.5. Разработка полпмеразной цепной реакции для выявления цнрковнрусов свиней в пробах патологического материала и инфицированных культурах клеток 70
З.б.Обнаружсннс ЦВС-1 в культурах клеток методом ПЦР 77
3.7. Селекция субпопуляций клеток из перевиваемой линии клеток РК-15 78
3.8. Исследование патологического материала из хозяйств РФ на наличие генома цирковируса свиней 2-го типа 79
3.9. Выделение ЦВС-2 с использованием культур клеток 82
3.9.1. Подготовка вируссодержащего материала для заражения культур клеток 82
3.9.2. Подбор клеточных линий 83
3.10. Концентрирование и очистка цирковируса свиней 2-го типа 86
3.10.1. Выделение ЦВС-2 из культур клеток 86
3.10.2. Выделение ЦВС-2 из патологического материала 86
3.11. Электронно-микроскопические исследования 89
3.12. Изучение филогенетического родства цнрковнрусов свиней 1-го и 2-го типов..91
3.13. Разработка полпмеразной цепной реакции в режиме реального времени (метод TaqMan) 95
4. Обсуждение 102
5. Выводы
6. Практические предложения 113
7. Список литературы
