Введение
4 Метаболизм нейролипинов в организме животных 13
4.1 Введение... 13
4.2 Биосинтез нейролипинов 16
4.2.1 N-ацилэтаноламиды [20] 16
4.2.2 Первичные амиды жирных кислот 24
4.2.3 N-ациламинокислоты [40] 27
4.2.4 2-ацилглицерины [19, 47] 29
4.2.5 N-ацилдофамины 32
4.2.6 Альтерантивные пути биосинтеза 33
4.3 Катаболизм нейролипинов 38
4.3.1 Гидролазный путь [38, 67, 68] 39
4.3.2 Оксигеназный метаболизм нейролипинов [47, 68] 43
4.3.3 Другие пути катаболизма 51
4.4 Заключение 53
5 Материалы и методы 57
5.1 Приборы 57
5.2 Растворы 58
5.3 Конечные концентрации веществ при инкубации 64
5.4 Определение концентрации белка по методу Лоури [90] 65
5.5 Определение концентрации белка по методу Лоури: микрометод.. 66
5.6 Экстракция липидов из инкубационной смеси 67
5.7 Твердофазная экстракция липидов 67
5.8 Экстракция суммарной фракции липидов из пресноводной гидры 68
5.9 Исследование продуктов экстракции методом вэТСХ ...68
5.10 Исследование продуктов экстракции методом ВЭЖХ 69
5.11 Авторадиография вэТСХ экстрактов, содержавших тритий-меченые вещества 70
5.12 Получение фракционированного гомогената из тканей крысы...71
5.12.1 Выделение фракции цитоплазматических мембран из гомогенатов органов крысы 72
5.12.2 Выделение митохондриальной фракции органов крысы 73
5.12.3 Выделение шероховатого эндоплазматического ретикулума 74
5.13 Очистка и контроль чистоты тритий-меченых липидов ...74
5.14 Синтез N-арахидоноил О-сульфодофамина 75
5.15 Синтез N-арахидоноил-л-этиламино-о-бензохинона 76
5.16 Изучение биосинтетических процессов в гомогенате тканей крысы и пресноводных гидр 76
5.17 Исследование биосинтеза N-ацилдофаминов в культурах клеток глиомы С6 и феохромацитомы РС12 77
5.18 Изучение гидролиза N-ацилдофаминов в осветлённом гомогенате пресноводных гидр 78
5.19 Окисление предшественников нейролипинов тирозиназой 79
5.20 Химическое окисление N-ацилдофаминов и их предшественников 79
5.21 Изучение метилирования нейролипинов 80
5.22 Изучение специфической активности арил сульфотрансферазы..81
5.23 Определение кинетических параметров для реакции сульфатирования 82
5.24 Изучение окисления нейролипинов в митохондриях и плазмалемме 82
5.25 Изучение влияния нейролипинов на NADH оксидоредуктазу плазмалеммы 83
5.26 Изучение взаимодействия AA-DAQ с белками 83
6 Результаты и их обсуждение 86
6.1 Биосинтез нейролипинов 89
6.1.1 Биосинтез нейролипинов в гомогенатах органов крысы 89
6.1.2 Окисление предшественников нейролипинов тирозиназои 101
6.1.3 Биосинтез в культуре клеток глиомы С6 и феохромацитомы РС12 103
6.1.4 Биосинтез в гомогенатах пресноводных гидр 105
6.2 Биохимические превращения N-ацилдофаминов 109
6.2.1 Гидролиз NADA и их предшественников 110
6.2.2 Метилирование N-ацилдофаминов 112
6.2.3 Сульфатирование 120
6.2.4 Окисление 128
7 Заключение 144
8 Выводы 147
9 Список литературы 148
Приложение А 165
Приложение В 173
Приложение С 175
