Введение
Глава 1. Физико-химические свойства металлических гидрозолей 17
1.1. Химия золота и его соединений 18
1.1.1. Степень окисления I 21
1.1.2. Степень окисления II 22
1.1.3. Степень окисления III 23
1.1.4. Степень окисления V , 23
1.2. Окислительно-восстановительные потенциалы ...23
1.3. Хлориды золота 30
1.4. Методы синтеза металлических коллоидов 33
1.4.1. Восстановление Au(III) органическими восстановителями 34
1.4.2. Механизмы формирования однородных металлических наночастиц в гомогенных растворах 35
1.4.3. Методы цитратного восстановления ...38
1.4.3.1. Цитратное восстановление по Френсу 43
1.4.3.2. Восстановление в присутствии ВМС 48
1.4.4. Зародышевые методы 54
1.4.5. Синтез на матрицах 57
1.4.5.1. Экспериментальное получение золотых несферических наночастиц 61
1.4.6. Микроэмульсионный метод 69
1.4.7. Дигестивное созревание 71
1.5. Заключение к 1 главе 74
Глава 2. Оптические свойства металлических гидрозолей 76
2.1. Поверхностный плазмонный резонанс (ППР) 76
2.1,1.Экспериментальное исследование ППР золотых золей различных размеров 85
2.1.1.1. Оптические константы золота и золотых частиц .87
2.1.1.2. Расчет спектров ослабления золей 90
2.1.1.3, Экспериментальные методики 94
2.1.1.4, Зависимость положения и величины максимума ослабления от размера частиц КЗ 95
2.2. Флюоресценция 104
2.3. Резонансное светорассеяние 105
2.3.1. Экспериментальное измерение спектров светорассеяния золей золота 110
2.3.1.1. Зависимость экстинкции и рассеяния от размера и концентрации частиц 111
2.3.1.2. Анализ оптической схемы и приборной погрешности 120
2.3.1.3. Воспроизводимость 122
2.3.1.4. Адекватность компенсации поглощения 123
2.3.1.5. Зависимость экстинкции и рассеяния от размера и полидисперсности частиц 125
2.4. Динамическое светорассеяние 131
2.4.1. Измерение размеров золотых наночастиц методом ДРС 134
2.5. Заключение к 2 главе136
Глава 3. Функционализация металлических наночастиц 138
3.1. Адсорбционный способ 146
3.1.1. Конъюгирование КЗ с олигопептидами и низкомолекулярными зондами 147
3.1.2. Конъюгирование КЗ с высокомолекулярными зондами 152
3.1.3. Оптическая модель биоконъюгатов: теоретический анализ 156
3.1.4. Оптическая модель биоконъюгатов: экспериментальные исследования 168
3.1.4.1. Многослойная модель биоконъюгатов КЗ 171
3.1.4.2. Неоднородная модель адсорбции желатина на частицах золота 184
3.2, Хемосорбционный способ 189
3.2.1. Получение ДНК-маркеров 192
3.2.1.1. Функционализация КЗ 5-тиоолиготимидином . 197
3.2.1.2. Спектрофотометри чески й контроль конъюгирования КЗ с олигонуклеиновыми кислотами 203
3.3. Активность биомакромолекул, иммобилизованных на металлических наночастицах208
3.3,1. Экспериментальные исследования активности ферментов, иммобилизованных на
наночастицах КЗ 212
3.4. Заключение к 3 главе... 214
Глава 4. Детектирование биоспецифических взаимодействий посредством коллоидно- металлических маркеров 217
4.1. Электронно-микроскопические исследования , 220
4.1.1. Электронно-микроскопические исследования поверхностных структур бактерий и белков цитоскелета 222
4.2. Светомикроскопические исследования 228
4.2.1. Свето-микроскопические исследования локализации актиновой составляющей цитоскелета 228
4.2.2.1. Темнопольная свето-микроскопическая визуализация ПРЧ 232
4.3. Пленарные решения : 241
4.3.1. Твердофазный анализ на мембранных фильтрах. 243
4.3.1.1. Экспериментальное исследование биоспецифических взаимодействий методом твердофазного анализа 244
4.4. Решения in vitro 256
4.4.1. Спектры экстинкции и рассеяния при специфической и неспецифической агрегации коллоидного золота 258
4.4.2. ДНК-функционализированные КЗ маркеры 269
4.4.2.1. ДНК-функционализированные КЗ маркеры в анализе РНК последовательностей 273
4.4.2.2. Агрегация КЗ-ОНК маркеров, индуцированная гибридизацией с комплементарными последовательностями 278
4.5. Заключение к 4 главе 283
Заключение 285
Список литературы 289
