Введение
Глава I. Обзор литературы 10
1.1. Модели эпилепсии на животных 10
1.1.1. Модели судорожной активности in vivo. Киндлинг 10
1.1.2. Этиология аудиогенных судорог 11
1.1.3. Аудиогенпая эпилепсия человека 12
1.1.4. Модели приобретенной аудиогенной эпилесии на животных 13
1.1.5. Наследственные аудиогенные судороги грызунов 13
1.1.6. Аудиогенный киндлинг 18
1.1.7. Биохимические изменения мозга при аудиогенной эпилепсии 18
1.2. Нейробиологические основы эпилептогенеза развивающегося мозга 20
1.3. Участие систем вторичных посредников в механизмах эпилептогенеза 22
1.3.1. Са2/калъмодулин-зависимое фосфорилирование белков 23
1.3.2. Внутриклеточные пути реализации сигнала, опосредуемого цАМФ. цАМФ-зависимое фосфорилирование белков 27
1.3.3. Серин/треониновые протеинфосфатазы. Кальцинейрин 32
1.3.4. Участие систем вторичных посредников в регуляции пластичности мозга и эпилептогенезе 35
1.3.5. Взаимосвязь Со2 - и цАМФ-зависимых систем вторичных посредников 38
1.4. Современные стретегии применения антиконвульсантов. Мелатонин и вальпроат натрия 41
Глава II. Материалы и методы исследования ...46
2.1. Материалы 46
2.2. Лабораторные животные 46
2.3. Исследование поведения крыс КМ в тесте «Открытое поле» 47
2.4. Оценка аудиогенной судорожной активности крыс линии КМ. Аудиогенный киндлинг 47
2.5. Аудиогенный киндлинг крыс КМ на фоне хронического употребления мелатонина и вальпроата натрия 48
2.6. Однократное введение мелатонина половозрелым крысам линии КМ и КМ после аудиогенного киндлинга 49
2.7. Однократное введение вальпроата натрия половозрелым крысам линии КМ и КМ после аудиогенного киндлинга 49
2.8. Введение мелатонина крысам линии КМ в течение 7 дней с последующим тестированием на аудиогенные судороги 50
2.9. Введение мелатонина крысятам линии КМ в различные сроки раннего постнатального развития (1-7,7-14 и 14-21 постнатальные дни) 50
2.10. Выделение структур мозга , 51
2.11. Приготовление гомогенатов 51
2.12. Определение концентрации белка 51
2.13. In vitro фосфорилирование белков мозга 51
2.13.1. сАМФ- зависимое фосфорилирование 52
2.13.2. Со2*/капьмодулин-зависимое фосфорилирование 52
2.13.3. Электрофорез и идентификация белков 52
2.14. Измерение активностей протеинкиназ 53
2.14.1. Измерение активности сАМФ-зависимой протеинкиназы 53
2.14.2. Измерение активности Со2*/калъмодулин-зависимой протеинкиназы Я...54
2.14.3. Оценка включения фосфата в пептидные субстраты протеинкиназ 55
2.15. Иммунохимические методы оценки содержания а-СаМКН, кальцинейрина и МАР2 с помощью иммунноблотинга 56
2.16. Электронно-микроскопические исследования 62
2.17. Статистическая обработка результатов исследований 58
Глава III. Результаты исследования и их обсуждение 59
3.1. Исследование систем Са ^/кальмодулин- и цАМФ-зависимого фосфорилирования белков в различных структурах мозга крыс линии КМ и крыс Вистар 59
3.2. Исследование Са +/кальмодулин - и цАМФ-зависимого фосфорилирования белков в различных структурах мозга крыс линии КМ через 2 суток после однократного звукового воздействия и после АК 64
3.3. Исследование действия мелатонина и вальпроата натрия на активность САМКИ и РКА 72
3.4, Влияние вальпроата натрия и мелатонина на аудиогенную судорожную активность крыс линии КМ и системы фосфорилирования 77
3.4.1. Исследование действия мелатонина (50 и 75 мг/кг) и вальпроата натрия (200 мг/кг) на аудиогенные судороги крыс линии КМ 77
3.4.2. Исследование действия мелатонина (50 и 75 мг/кг) и вальпроата натрия (200 мг/кг) на миоклонические судороги крыс линии КМ после аудиогенпого киндлтга 85
3.4.3 Хроническое введение мелатонина крысам КМ в течение 7 дней с последующим тестированием на аудиогенные судороги.. 88
3.5. Влияние хронического потребления вальпроата натрия и мелатонина крысами КМ на аудиогенную судорожную активность во время аудиогенного киндлинга 90
3.6. Исследование отставленного действия раннего постнатального введения мелатонина на аудиогенные судороги половозрелых крыс линии КМ 92
3.6.1. Введение мелатонина в возрасте с 1-го по 7-й Р дни 92
3.6.2. Введение мелатонина в возрасте с 14-го по 21-й Р дни , 98
3.6.3. Введение мелатонина в возрасте с 7-го по 14-й Р дни 103
Заключение 113
Выводы 116
Список литературы 117
