Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. История знаний о МДС 12
1.2. Классификация МДС 13
1.3. Цитогенетические исследования при МДС 18
1.4. Клиническое значение хромосомных аномалий при МДС 20
1.4.1. Аномалии хромосомы 5 21
1.4.2. Аномалии хромосомы 7 22
1.4.3. Аномалии хромосомы 8 23
1.4.4. Комплексный кариотип и клональная эволюция 24
1.5. МДС – клональное заболевание стволовой кроветворной клетки 25
1.5.1. Цитогенетические исследования кроветворных клеток-предшественниц 29
1.6. Роль стромального микроокружения 30
1.6.1. Строма костного мозга. Мезенхимальные стромальные клетки 30
1.6.2. Функциональные особенности стромы при МДС 33
1.6.3. Цитогенетические исследования клеток стромы 35
2. Материалы и методы 40
2.1. Дизайн исследования 40
2.2. Характеристика больных 41
2.3. Лабораторные исследования 42
2.3.1. Получение фракции мононуклеаров 42
2.3.2. Селекция CD34+ кроветворных клеток-предшественниц из костного мозга и периферической крови 43
2.3.3. Получение культуры МСК 44
2.3.4. Стандартное цитогенетическое исследование 46
2.3.5. Флюоресцентная in situ гибридизация 46
2.4. Статистический анализ 49
3. Результаты и обсуждение 50
3.1. Цитогенетическое исследование клеток костного мозга 50
3.2. Определение групп риска в соответствии с прогностическими шкалами IPSS, WPSS и IPSS-R 52
3.3. Результаты динамического наблюдения за больными МДС 56
3.4. Характеристика CD34+ клеток-предшественниц, полученных из костного мозга и периферической крови 60
3.4.1. Содержание CD34+ клеток в костном мозге и периферической крови 60
3.4.2. Исследование цитогенетических аномалий в CD34+ клетках 63
3.4.3. Хромосомные аномалии в CD34+ клетках в зависимости от клинического варианта заболевания 68
3.4.4. Хромосомные аномалии в CD34+ клетках в зависимости от их прогностической значимости 69
3.4.5. Хромосомные аномалии в CD34+ клетках в зависимости от клеточности костного мозга 70
3.4.6. Хромосомные аномалии в CD34+ клетках в зависимости от фиброза в костном мозге 71
3.5. Характеристика МСК костного мозга 72
3.5.1. Темпы роста культуры МСК у больных и здоровых лиц 72
3.5.2. Темпы роста культуры МСК в зависимости от клинического варианта заболевания, группы риска IPSS-R, клеточности костного мозга и наличия фиброза 75
3.5.3. Стандартное цитогенетическое исследование МСК 78
3.5.4. Цитогенетическое исследование МСК методом FISH 80
3.5.5. Клиническое наблюдение пациента с клональными нарушениями кариотипа МСК 83
Заключение 87
Выводы 90
Библиографический список
