Введение
Обзор литературы 8
Денсовирусы 8
Общая характеристика денсовирусов 8
Краткое описание структурно-функциональной организации денсовирусов, инфицирующих различные виды насекомых 13
Генетические элементы, содержащие домен обратной транскриптазы 48
Мобильные элементы 56
Типы мобильных элементов 57
Дупликация сайтов-мишений 58
Мобильные элементы как диспергированные повторяющиеся последовательности. 60
Индукция мобильных элементов под действием стресса 61
Материалы и методы 65
Условия содержания В. germanica 65
Постановка скрещиваний 65
Линии В. germanica, использованные в работе 66
Выделение тотальной ДНК рыжего таракана 66
Электрофорез в агарозном геле 67
Полимеразная цепная реакция 67
Получение очищенных продуктов ПЦР 68
Лигирование фрагментов ДНК 68
Трансформация клеток Е. coli 69
Выделение и очистка плазмидной ДНК для идентификации рекомбинантных молекул 70
Рестрикция рекомбинантных плазмид для установления длины вставки 72
Секвенирование ДНК 72
Компьютерный анализ 72
Саузерн-блот гибридизация 73
Поддержание пересеваемой культуры клеток B.germanica 73
Облучение клеток у-лучами 75
Микроинъекции вирусных частиц под кутикулу тараканов 75
Электронная микроскопия срезов ткани тараканов 76
Результаты и обсуждение 77
1. Распространенность денсовируса BgDNV в популяциях рыжего таракана 78
2. Пересеваемая культура клеток рыжего таракана как модель для изучения денсовируса 80
3. Анализ тканеспецифичности развития вирусной инфекции 87
4. Заражение рыжего таракана денсовирусом Bp/DNV методом микроинъекций. Поддержание вируса в лабораторных условиях 89
5. Определение видоспецифичности вируса 92
6. Обнаружение ретроэлементов рыжего таракана и анализ их взаимодействия с денсовирусом BgDNV 93
Обнаружение ретроидных элементов рыжего таракана Активизация выявленных ретроэлементов под действием денсовируса BgDNV
Выводы
Список литературы
