Введение
2. Обзор литературы 7
2.1. Фукоиданы 7
2.1.1. Распространение 7
2.1.2. Структура 7
2.1.3. Функции, выполняемые фукоиданами в бурых водорослях и иглокожих
2.1.4. Биологическая активность фукоиданов
2.2. Фукоиданазы 13
2.2.1. Номенклатура. Известные представители 13
2.2.2. Физико-химические свойства фукоиданаз 13
2.2.3. Тип действия и специфичность фукоиданаз 17
2.2.4. Условия культивирования морских бактерий, синтезирующих фукоиданазу 20
2.3. Альгиновые кислоты 23
2.3.1. Распространение 23
2.3.2. Структура 23
2.3.3. Биологическая активность альгиновых кислот 25
2.3.4. Применение альгиновых кислот и их солей 26
2.4. Альгинат-лиазы 26
2.4.1. Распространение. Номенклатура 26
2.4.2. Свойства и специфичность альгинат-лиаз моллюсков и водорослей 27
2.4.3. Альгинат-лиазы морских бактерий 28
2.4.4. Альгинат-лиазы почвенных бактерий 29
2.4.5. Альгинат-лиазы морских грибов, бактериофагов и вирусов 37
2.4.6. Классификация альгинат-лиаз 37
2.4.7. Биосинтез альгинат-лиаз 41
2.4.8. Сведения о структуре каталитического центра 41
2.4.9. Возможный механизм каталитического действия альгинат-лиазы АМН из Shingomonas sp. Al 44
2.4.10. Биологические функции альгинат-лиаз 45
2.4.11. Применение альгинат-лиаз 46
3. Материалы и методы исследования 47
3.1. Микроорганизмы и условия их культивирования 47
3.2. Реагенты 48
3.3. Субстраты 48
3.4. Аналитические и физико-химические методы 49
3.5. Определение активности О-гликозилгидролаз 49
3.6. Выделение и очистка ферментов 50
3.6.1. Фукоидан-деградирующие ферменты морской бактерии P. citrea КММ 3296 50
3.6.2. Альгинолитические ферменты морской бактерии P. citrea КММ 3297 51
3.7. Исследование свойств ферментов 51
3.8. Получение и характеристика субстратов и продуктов их деградации 53
4. Обсуждение результатов 56
4.1. Распространение О-гликозилгидролаз в морских бактериях 56
4.1.1. Фукоиданазы морских бактерий-эпифитов бурых водорослей 57
4.1.2. Фукоиданазы морских бактерий-изолятов голотурии Apostichopus japonicus , 58
4.1.3. Гликозилгидролазы морских бактерий P. cilrea 62
4.2. Особенности деградации фукоидана морскими бактериями P. citrea 65
4.2.1. Физико-химические свойства фукоиданаз 66
4.2.2. Специфичность фукоиданаз 67
4.2.3. Особенности деградации фукоидана из F. evanescens под действием фукоиданазы из морской бактерии P. citrea КММ 3296 69
4.3. Внутриклеточные альгинолитические ферменты морской « бактерии P. citrea КММ 3297 73
4.3.1. Влияние компонентов питательной среды на синтез альгинолитических ферментов 73
4.3.2. Выделение, очистка и разделение альгинолитических ферментов 76
4.3.3. Физико-химические свойства альгинолитических ферментов морской бактерии P. citrea КММ 3297 77
4.3.4. Влияние ионов Na+ и двухвалентных металлов на активность апьгинат-лиаз 79
4.4. Субстратная специфичность альгинолитических ферментов морской бактерии P. citrea КММ 3297 80
4.4.1. Структурные характеристики субстратов 80
4.4.2. Действие альгинолитических ферментов на альгиновые кислоты и фукоидан 81
4.4.3. Исследование энзиматических свойств альгинат-лиаз 85
Выводы 88
Список литературы 90
