Введение
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
А. ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ КОМПОНЕНТОВ ТРАНСЛЯЦИОННОГО АППАРАТА
И РЕГУЛЯЦИЯ БИОСИНТЕЗА БЕЛКА В ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ 7
1. ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ ФАКТОРА ИНИЦИАЦИИ elF-2 7
1.1. Ингибитор трансляции, появляющийся в лизатах ретикулоцитов при недостатке гемина 7
1.2. Ингибитор трансляции, появляющийся в лизатах ретикулоцитов при добавлении двуспиральной РНК........II
1.3. HCI и DAI - две разные протеинкиназы с одинаковой . . специфичностью по отношению eIF-2 14
1.4* Каким образом фосфорилирование eIF-2 приводит . к остановке трансляции в лизатах. ретикулоцитов? 15
1.5. Дефосфорилирование eiF-2oo 17
1.6. Фосфорилирование eIF-2/З 18
1.7. Фосфорилирование других факторов инициации 19
2. ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ РЙБОС0МН0Г0 БЕЛКА S6 20
2.1. Что приводит к изменению степени фосфорилирования 20
2.2. Как фосфорилирование S6 может.быть связано с активацией трансляции?. 23
3. ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ ЖИНОАЦИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗ 26
Б. ВЗАИМНЫЙ ОБМЕН СВОБОДНЫХ РНК-СВЯЗЫВАВДИХ И ИНФОМОСОМНЫХ БЕЛКОВ - ВЕРОЯТНЫЙ МЕХАНИЗМ РЕГУЛЯЦИИ. ЭКСПРЕССИИ мРНК 27
I. НЕКОТОРЫЕ БЕЛКИ ИНФОВЮСОМ ПРИСУТСТВУЮТ В ЦИТОПЛАЗМЕ В СВОБОДНОМ СОСТОЯНИИ 29
2. СВОБОДНЫЕ ЩТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ И П0ЛИС0М0СШЗАННЫЕ ШФОШОСОМЫ СОДЕРЖАТ РАЗНЫЙ НАБОР БЕЛКОВ ... 38
3. СВОБОДНЫЕ ЩТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ ИНФОНЮСОМЫ СОДЕРЖАТ РЕПРЕССОР ТРАНСЛЯ1Щ,.ОТСУТСТВУЩИЙ В ПОЛИСОМОСВЯЗАННЫХ ИНФОИЮСОМАХ 42
4. ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ БЕЛКОВ ИНФОВЮСОМ 47
5. цАМФ-НЕЗАВИСИМЫЕ ПРОТЕИНКИНАЗЫ -.ФЕРМЕНТЫ, ФОСФОРИЛИРУЮЩИЕ БЕЛКИ ИНФОВЮСОМ 51
5.1. Цитоплазматические казеиновые киназы 52
5.2. Ядерные казеиновые киназы 56
5.3. Возможные субстраты казеиновых киназ 58
5.4. Гистоновые киназы. ,65
5.5. Протеинкиназы,. ассоциированные. с микросомами 66
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 68
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 70
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 70
1. Буферные растворы 70
2. Получение ооцитов рыб и амфибий 70
3. Гомогенизация ооцитов и получение безрибосомного экстракта .71
4. Иммобилизация поли(У) на сефарозе 72
5. Выделение РНК-связыващих.белков из.безрибосомных. экстрактов ооцитов 73
6. Выделение РНК-связывающей протеинкиназы........ 73
7. Дефосфорилирование казеина. .74
8. Определение протеинкиназной активности........ «.74
9. Получение препаративных количеств!! 2Р]казеина... ..75
10. Получение [14С] рРНК 75
11. Определение РНК-связывающей активности 77
