Введение
1. Обзор литературы 10
1.1. Регенерация кожи и заживление ран 10
1.1.1. Воспаление 12
1.1.2. Восстановление эпидермиса 15
1.1.3. Формирование грануляционной ткани 16
1.1.4. Восстановление сосудистой сети 17
1.1.5. Контракция раны 18
1.1.6. Ремоделирование ткани 19
1.2. Методы лечения повреждений кожи 20
1.2.1. Кожные трансплантаты 21
1.2.2. Тканеинженерные конструкции для восстановления кожи 22
1.2.3. Раневые покрытия 25
1.3. Биосовместимые материалы как основа конструкций для восстановления кожи 29
1.3.1. Материалы для тканевой инженерии и регенеративной медицины 30
1.3.2. Влияние ВКМ и биосовместимых материалов на функции клеток 32
1.3.3. Фиброин 36
1.3.4. Метакрилированный желатин 41
1.4. Мышиная модель полнослойной раны кожи 44
2. Материалы и методы 46
2.1. Материалы 46
2.1.1. Клеточные линии 46
2.1.2. Лабораторные животные 47
2.2. Методы 47
2.2.1. Синтез метакрилированного желатина 47
2.2.2. Получение водного раствора фиброина шёлка 48
2.2.3. Получение раствора ЖМА и фиброина в смеси вода/ДМСО 48
2.2.4. Получение раствора ЖМА и фиброина в смеси вода/пропиленгликоль 48
2.2.5. Получение водного раствора ЖМА и фиброина 48
2.2.6. Формирование фотополимеризуемых пленок 49
2.2.7. Получение микроструктурированных поверхностей 49
2.2.8. Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) 50
2.2.9. Изучение механических свойств фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина 50
2.2.10. Исследование биодеградации фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина в модельной системе in vitro 50
2.2.11. Культивирование клеток на поверхности фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина 51
2.2.12. Изучение адгезии и пролиферации фибробластов на поверхности фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина 52
2.2.13. МТТ-тест 52
2.2.14. Определение количества живых и мертвых фибробластов при культивировании на поверхности фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина 53
2.2.15. Исследование организации цитоскелета фибробластов на поверхности фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина 53
2.2.16. Изучение подвижности клеток на поверхности фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина в модели «рана» 54
2.2.17. Модель полнослойной раны кожи мыши 54
2.2.18. Морфометрический анализ скорости затягивания раны и площади сформированного рубца 55
2.2.19. Проведение гистологических исследований 55
2.2.20. Статистическая обработка экспериментальный данных 56
3. Результаты 57
3.1. Получение и характеристика фотоотверждаемых пленок на основе фиброина шелка и метакрилированного желатина 57
3.2. Культивирование клеток, участвующих в регенерации кожи, на фотополимеризуемых пленках на основе фиброина и метакрилированного желатина 63
3.3. Исследование влияния фотополимеризуемых пленок на основе ЖМА и фиброина на регенерацию в мышиной модели полнослойной раны кожи 72
4. Обсуждение 77
4.1. Получение и характеристика фотополимеризуемых пленок на основе метакрилированного желатина и фиброина шелка 77
4.2. Культивирование клеток, участвующих в регенерации кожи, на фотополимеризуемых пленках на основе фиброина и метакрилированного желатина 87
4.3. Исследование влияния фотоотверждаемых пленок из метакрилированного желатина и фиброина на регенерацию кожи в мышиной модели полнослойной раны кожи 91
5. Заключение 93
Список использованной литературы 95
Список сокращений и обозначений 114
Список иллюстративного материала 116
Благодарности 118
Список работ, опубликованных по теме диссертации 119
