Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1. Клинические аспекты травмы спинного мозга 17
1.2. Патогенез травмы спинного мозга: тканевые, клеточные и молекулярные аспекты 23
1.3. Молекулярные факторы контроля нейрорегенерации при травме спинного мозга 42
1.3.1. Ингибиторы роста аксонов .42
1.3.2. Молекулы внеклеточного матрикса 43
1.3.3. Молекулы-навигаторы 43
1.3.4. Молекулы потенциальных стимуляторов нейрорегенерации .46
1.3.4.1. Сосудистый эндотелиальный фактор роста VEGF 46
1.3.4.2. Фактор роста фибробластов FGF2 47
1.3.4.3. Глиальный нейротрофический фактор GDNF .49
1.3.4.4. Молекулы адгезии .50
1.4. Клеточная терапия при травме спинного мозга 51
1.4.1. Клетки обонятельной выстилки .52
1.4.2. Шванновские клетки .54
1.4.3. Эмбриональные стволовые клетки .57
1.4.4. Нейральные стволовые клетки .58
1.4.5. Мезенхимные стволовые клетки 60
1.4.6. Клетки стромы костного мозга 61
1.4.7. Клетки крови пуповины .63
1.5. Генная терапия при травме спинного мозга 69
1.5.1. Вирусные векторы для доставки терапевтических генов при травме спинного мозга 70
1.5.2. Невирусные векторы 73
1.6. Клеточно-опосредованная доставка терапевтических генов при травме спинного мозга (генно-клеточная терапия) 80
ГЛАВА 2. Материалы и методы
2.1. Животные и экспериментальные группы .85
2.1.2. Дозированная контузионная травма спинного мозга 85
2.1.3. Клетки обонятельной выстилки человека 87
2.1.4. Клетки крови пуповины человека .89
2.2. Гистологические исследования 91
2.2.1. Зоны морфометрии .92
2.2.2. Трансмиссионная электронная микроскопия 93
2.2.3. Иммуногистохимия .93
2.3. Создание AdV-GDNF и трансдукция клеток крови пуповины .94
2.4. Оценка восстановления функции спинного мозга .95
2.5. Световая микроскопия 96
2.6. Программное обеспечение и статистическая обработка результатов 96
ГЛАВА 3. Результаты исследования и их обсуждение
3.1. Эффекты трансплантации в область травматического повреждения нативных КОВ и ККП человека, их жизнеспособность и миграционный потенциал 97
3.1.1. Влияние трансплантации КОВ на посттравматическую регенерацию спинного мозга крысы .97
3.1.2. Влияние трансплантации ККП на посттравматическую регенерацию спинного мозга крысы .112
3.2. Влияние на посттравматическую регенерацию спинного мозга крысы трансплантации ККП, трансфицированных плазмидой pBud-VEGF-FGF2 .128
3.3. Эффективность посттравматической регенерации при прямой генной терапии плазмидой pBud-VEGF-FGF2 156
3.4. Влияние ККП, трансдуцированных аденовирусом AdV-GDNF, на
посттравматическую регенерацию 181
4 3.5. Эффективность посттравматической регенерации при прямой генной терапии аденовирусом AdV-GDNF 199
Заключение .214
Выводы .217
Список литературы 220
