Введение
1. Обзор литературы. Общие представления о механизмах токсического поражения печени и методах его коррекции 19
1.1 Роль печени в обезвреживании лекарственных средств 25
1.2 Роль печени в обезвреживании промышленных гепатотоксикантов 29
1.2.1 Гепатотропные эффекты алифатического галогенизированного углеводорода метана - четыреххлористого углерода. Механизм его токсического действия и влияния на обменные процессы в организме 29
1.2.2 Токсическое воздействие тетрахлорметана на желудочные и поджелудочную железы 32
1.3 Роль печени в обезвреживании этанола. Патобиохимические основы формирования алкогольной болезни печени 34
1.3.1 Современные представления о метаболизме этанола в организме человека 34
1.3.2 Особенности протекания метаболических процессов в условиях алкогольной интоксикации 39
1.4 Биологически активные вещества растительного и животного происхождения и фармпрепараты в терапии патологических состояний печени 47
2. Материалы и методы исследований 60
2.1 Характеристика экспериментальных животных и порядок их исполь зования 60
2.1.1 Методы моделирования экспериментального токсического поражения печени у крыс 61
2.1.1.1 Моделирование токсической печеночной недостаточности, вызванной введением тетрахлорметана 61
2.1.1.2 Моделирование токсического поражения печени, вызванного введением этанола 62
2.1.1.3 Моделирование токсического поражения печени, вызванного
2.1.2 Эвтаназия подопытных животных и забор биоматериалов для морфоло гических и биохимических исследований 62
2.2 Биохимические методы исследования 65
2.2.1 Биохимические маркеры функционального состояния печени 66
2.2.1.1 Исследование активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля 66
2.2.1.2 Исследование активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля 67
2.2.1.3 Исследование активности у-глутамилтранспептидазы в сыворотке крови унифицированным колориметрическим методом 67
2.2.1.4 Исследование активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови унифицированным методом Бессея, Лоури, Брока 68
2.2.1.5 Определение концентрации в сыворотке крови общего и прямого билирубина методом Ендрассика-Грофа 68
2.2.2 Исследование параметров углеводного обмена 68
2.2.2.1 Определение концентрации глюкозы в сыворотке крови энзиматичес ким колориметрическим методом по реакции Триндера 68
2.2.2.2 Определение концентрации пировиноградной кислоты в сыворотке крови модифицированным колориметрическим методом Умбрайта 69
2.2.2.3 Определение концентрации молочной кислоты в сыворотке крови энзи-матическим колориметрическим методом 69
2.2.3 Исследование параметров белкового метаболизма 70
2.2.3.1 Исследование содержания общего белка в сыворотке крови методом Брэдфорда 70
2.2.3.2 Исследование содержания альбумина в сыворотке крови по реакции с
2.2.3.3 Исследование белковых фракций сыворотки крови турбидиметричес ким методом Олла и Маккорда в модификации С.А. Карпюка 70
2.2.4 Исследование показателей метаболизма липидов 2.2.4.1 Определение содержания общего холестерина в сыворотке крови энзи-матическим колориметрическим методом Триндера 71
2.2.4.2 Определение содержания триацилглицеринов в сыворотке крови энзи-матическим колориметрическим методом Буколо и Дэвида 71
2.2.4.3 Определение содержания этерифицированного и неэтерифицирован-ного холестерина в сыворотке крови методом Златкиса – Зака 72
2.2.4.4 Определение содержания холестерина липопротеидов высокой плот-ности в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом 72
2.2.4.5 Расчет концентрации холестерина в липопротеидах очень низкой и низкой плотности в сыворотке крови 72
2.2.4.6 Расчет коэффициентов атерогенности для оценки нарушений метаболизма липидов при токсическом поражении печени 73
2.2.4.7 Исследование липидов эритроцитов методом тонкослойной хромато-гафии 73
2.2.4.7.1 Выделение липидов из эритроцитов методом экстракции 74
2.2.4.7.2 Фракционирование общих липидов эритроцитов 74
2.2.4.7.3 Фракционирование фосфолипидов эритроцитов 75
2.2.5 Исследование показателей системы про-/антиоксиданты 76
2.2.5.1 Исследование содержания ТБК-реактивных продуктов в сыворотке крови 76
2.2.5.2 Исследование активности каталазы в гемолизате эритроцитов 77
2.2.5.3 Исследование активности супероксиддисмутазы в гемолизате эритро-цитов 77
2.2.6 Исследование активности пищеварительных ферментов в гомогенатах слизистой оболочки желудка и ткани поджелудочной железы 77
2.2.6.1 Определение активности пепсина в гомогенатах слизистой оболочки желудка экспресс-методом Н.П. Пятницкого 78
2.2.6.2 Определение активности трипсина в гомогенатах поджелудочной железы методом Эрлангера в модификации Шатерникова 79
2.2.6.3 Определение активности химотрипсина в гомогенатах поджелудочной железы 79
2.3 Методы исследования химического состава и свойств липидов продуктов растительного происхождения 79
2.3.1 Исследование жирнокислотного состава липидных экстрактов методом газо-жидкостной хроматографии 80
2.3.2 Определение йодного числа липидов в экстрактах продуктов растительного происхождения 80
2.3.3 Определение массовой доли неомыляемых веществ в экстрактах продуктов растительного происхождения 81
2.4 Определение антиоксидантной активности исследуемых продуктов расти тельного происхождения в экспериментах in vitro 81
2.4.1 Исследование продуктов растительного происхождения в опытах с использованием липосомальной системы перекисного окисления 82
2.4.2 Приготовление суспензии липосом для использования в модельных биохимических тест-системах 82
2.4.3 Определение содержания в суспензии липосом продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой 83
2.4.4 Исследование антиоксидантной активности исследуемых продуктов растительного происхождения 83
2.5 Исследование метаболической доступности исследуемых продуктов растительного происхождения по степени их липолиза 84
2.6. Морфологические методы исследования ткани печени крыс 85
2.7 Статистические методы исследования 85
3. Исследование химического состава и свойств продуктов растительного происхождения с предполагаемыми гепатопротекторными свойствами 86
3.1 Анализ химического состава липофильных продуктов растительного происхождения с потенциальными гепатопротекторными свойствами 86
3.2 Изучение антиоксидантных свойств исследуемых растительных масел и фармпрепаратов на основе эссенциальных фосфолипидов 92
3.3 Метаболическая доступность исследуемых продуктов растительного происхождения и фармпрепаратов на основе эссенциальных фосфолипидов по параметрам их липолиза 97
4. Биохимические показатели крови крыс с моделированием токсического поражения печени различными гепатотоксикантами 101
4.1 Активность ферментов-маркеров функционального состояния печени при моделировании ее токсического поражения этанолом 101
4.2 Активность ферментов-маркеров функционального состояния печени при моделировании ее токсического поражения парацетамолом 103
4.3 Параметры биохимических показателей функционального состояния печени при моделировании ее токсического поражения тетрахлорметаном 105
5. Патобиохимическая характеристика эффектов, обусловленных введением крысам тетрахлорметана и ее морфологическая верификация 112
5.1 Характеристика основных биохимических параметров углеводного обмена у крыс с моделированием токсического поражения печени, вызванного тетра-хлорметаном 112
5.2 Влияние интоксикации тетрахлорметаном на параметы белкового обмена у экспериментальных животных 114
5.3 Изменение липидного обмена у крыс при моделировании острой печеночной недостаточности, вызванной введением тетрахлорметана 118
5.4 Характеристика процессов свободнорадикального окисления и состояния ферментативного звена антиоксидантной системы крови при остром токсическом поражении печени крыс тетрахлорметаном 128
5.5 Влияние интоксикации тетрахлорметаном на активность протеолитических ферментов в ткани поджелудочной железы и слизистой оболочке желудка крыс 131
5.6 Морфологическая характеристика ткани печени крыс с моделированием токсического поражения печени четыреххлористым углеродом в сопоставле нии с данными контрольной группы экспериментальных животных 134
5.6.1 Цитологическая картина ткани печени животных контрольной группы и крыс с острой интоксикацией, вызванной введением тетрахлорметана 134
5.6.2 Гистологическая картина ткани печени контрольной группы крыс и крыс с моделированием токсического поражения печени тетрахлорметаном 139
6. Влияние исследуемых растительных масел и препарата «Фосфоглив» на морфофункциональный статус гепатоцитов и состояние метаболичес ких процессов у крыс с моделированием острого токсического поражения печени 148
6.1 Влияние изучаемых продуктов растительного происхождения или препарата «Фосфоглив» на морфологическую картину печени крыс с моделированием острого токсического поражения печени, вызванного введением тетрахлорметана 148
6.2 Влияние исследуемых растительных масел или препарата «Фосфоглив» на параметры биохимических маркеров функционального состояния гепатоцитов
у крыс с моделированием острого токсического поражения печени 156
6.3 Влияние исследуемых растительных масел или препарата «Фосфоглив» на основные параметры углеводного обмена у крыс с острой токсической печеночной недостаточностью, вызванной введением тетрахлорметана 160
6.4 Влияние исследуемых веществ на параметры белкового обмена у крыс с острым токсическим поражением печени 164
6.5 Влияние исследуемых растительных масел или фармпрепарата «Фосфоглив» на липидный обмен у крыс с острым токсическим поражением печени, индуцированным четыреххлористым углеродом 167
6.6 Влияние исследуемых липофильных продуктов растительного происхождения или препарата «Фосфоглив» на процессы свободно-радикального окисления и состояние ферментативного звена антиоксидантной системы крови при остром токсическом поражении печени крыс тетрахлорметаном 179
6.7 Влияние исследуемых продуктов растительного происхождения или фармпрепарата «Фосфоглив» на активность протеолитических ферментов желудка и поджелудочной железы у крыс с интоксикацией четыреххлористым углеродом 182
Заключение 185
Выводы 199
Список используемых сокращений 201
Список литературы 203
