Введение
1. Обзор литературы 12
1.1. Главный комплекс гистосовместимости человека 12
1.1.2. Генетическая карта области HLA человека 13
1.1.3. Строение и функционирование HLA-мопекуп
1.1.3.1. Строение HLA-молекул класса I .15
1.1.3.2. Строение HLA-молекул класса ff 18
1.1.3.3. Функции молекул HLA 21
1.1.4. Клиническое и биологическое значение полиморфизма HLA-генов 23
1.2. "HLA ибояезни" 25
1.2.1. Предполагаемые причины.и механизмы ассоциаций HLA-аллелей с болезнями 26
1.2.2 Ассоциации между HLA-системой и заболеваниями... 28
1.2.2.1.HLA и гемобластозы 30
1.3. Современные методы исследования системы HLA 41
1.3.1. Методы HLA-типирования, основанные на Пир .42.
1.3.1.1. PCR-SSP (Полимеразная цепная реакция с сиквенс-специфическими праймерами) 45
1.3.1.2. PCR-SSOP (Полимеразная цепная реакция + сиквенс-специфические олигонуклеотид ные пробы) 46
1.3.1.3 PCR-SBT (Полимеразная цепная реакция + типирование, базирующееся на сиквенировании) .47
ГЛАВА 2. Материалы и методы 48
2.1. Исследуемый контингент.. 48
2.2.-2.3. Методы выделения и исследования анализируемого материала 50
2.2. Метод ы выделения исследованного материала 50
2.2.1. Выделение мононуклеарных клеток 50
2.2.2.Экстракция ДНК с помощью протеиназы К 50
2.2.2.1.Выделение ДНК из клеток периферической крови для амплификации локусов DRB1 и DQB1 50
2,2.2.2.Выделение ДНК методом высаливания белков 51
2.2.2.3.Выделение ДИК фенольно-хлороформньш методом... 51
2.2.3.0пределение концентрации и чистоты ДНК 52
2.3. Методы исследования анализируемого материала 52
2.3.1.Серологическое типирование , 52
2.3.2. Амплификация ДНК 53
2.3.2.1. Амплификация локуса HLA-DRB1 (PCR-SSP) 53
2.3.2.2. Амплификация локуса HLA-DRB1 в модификации ГНЦ-институт иммунологии (PCR-mSSP) .55
2.3.2.3. Амплификация локуса HLA-DQB1 (PCR-mSSP)
2.3.2.4. Амплификация аллелей специфичности HLA-A19 (PCR-SSP) 56
2.3.3. Гель-электрофорез продуктов амплификации 57
2.4.Статистическая обработка результатов 58
ГЛАВА 3. Контроль качества типирования и получение контрольных стандартов 60
3.1. Контроль качества типирования методом PCR-SSP 60
3.2. Распределение вариантов генов HLA класса I и II в популяции восточнославянских кавказоидов 65
3.3. Особенности строения пептидсвязывающего сайта молекулы DR... 71
ГЛАВА 4. Иммуногенетические маркёры гемобластозов 78
4.1 Иммуногенетические показатели больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) 78
4.2. Иммуногенетические показатели больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ). 84
4.3. Иммуногенетические показатели больных хроническиммиелопейкозом(ХЛЛ) .89
4.4. Ассоциации HLA-системы с предрасположенностью и резистентностью к развитию лимфогранулематозом (ЛГМ) 93
ГЛАВА 5. Ассоциации между строением антигенсвязывающего сайта молекулы dr и гемобластозами .104
Глава 6. Распределение и наследование hla-антигенов/ специфичностей в семьях больных гемобластозами .127
Заключение 138
Выводы 157
Практические рекомендации 159
Литература
