Введение
Глава 1. Гибридизация мягкой пшеницы Triticum aestivum L. и ржи посевной Secale cereale L для создания новых форм растений и методы геномного анализа растений гибридного происхождения (Обзор литературы) 12
1.1. Значение отдаленной гибридизации 12
1.2. Генетический контроль скрещиваемости мягкой пшеницы с рожью посевной 13
1.3. Основные типы реконструкции ядерных геномов при отдаленной гибридизации 15
1.3.1. Пшенично-ржаные амфиплоиды 15
1.3.2. Пшенично-ржаные дополненные линии 16
1.3.3. Пшенично-ржаные замещенные линии 18
1.3.4. Пшенично-ржаные линии с транслокациями и рекомбинантные линии..22
1.4. Методы анализа геномов растений, полученных на основе отдаленной гибридизации 24
1.4.1. Цитогенетические методы геномного анализа 24
1.4.2. Методы дифференциальной окраски хромосом 26
1.4.3. Флуоресцентная in situ гибридизация 28
1.4.4. Биохимический методы геномного анализа 30
1.4.5. Молекулярные маркеры 31
1.4.5.1. RFLP-маркеры 32
1.4.5.2. STS-маркеры 34
1.4.5.3. RAPD-маркеры 34
1.4.5.4. AFLP-маркеры 37
1.4.5.5. SSR-маркеры 38
1.4.5.6. ISSR-маркеры 42
Глава 2. Материалы и методы 44
Глава 3. Результаты 49
3.1 Молекулярный SSR-анализ пшенично-ржаных замещенных линий 49
3.1.1. Определение типа замещений у пшенично-ржаных замещенных линий 49
3.1.2. Изучение генотип ической среды пшенично-ржаных замещенных линий 55
3.1.3. Локализация SSR-маркеров пшеницы на хромосомах ржи замещенных линий 57
Глава 4. Характеристика пшенично-ржаных замещенных линий с использованием
микросателлитных маркеров (Обсуждение) 60
ЧАСТЬ II. Изучение влияния отдельных хромосом ржи на показатели андрогенеза in vitro на примере пшенично-ржаных замещенных
линий 67
Глава 1. Андрогенез in vitro (Обзор литературы) 67
1.1. Значение гаплоидов в генетике и селекции растений 67
1.2. Метод гаплопродюсеров 68
1.3. Метод культивирования пыльников in vitro 70
1.3.1. Последовательность этапов культивирования пыльников in vitro 71
1.3.2. Андрогенез in vitro 73
1.3.3. Факторы, влияющие на показатели андрогенеза in vitro 74
1.3.3.1. Стадия развития микроспор 74
1.3.3.2. Методы температурной предобработки пыльников 76
1.3.3.3. Условия культивирования. Температурный режим 77
1.3.3.4. Особенности минерального и органического состава искусственных питательных сред для культивирования пыльников in vitro 77
1.3.4. Генетические факторы, влияющие на признаки андрогенеза in vitro 81
1.3.4.1. Влияние генетических факторов на эффективность андрогенного эмбриоидогенеза мягкой пшеницы 82
1.3.4.2. Влияние генетических факторов на общую регенерационную способность андрогенных эмбриоидов и регенерацию зеленых и хлорофилл-дефектных проростков у мягкой пшеницы 85
1.3.4.3. Влияние генетических факторов на признаки андрогенеза in vit ro ржи посевной (Secale cereale L) 86
1.4. Гаметоклональная изменчивость и методы ее изучения 88
Глава 2. Материалы и методы 95
Глава 3. Результаты 100
3.1. Изучение особенностей андрогенеза in vitro у пшенично-ржаных замещенных линий 100
3.1.1. Показатели частоты продуктивных пыльников 100
3.1.2. Показатели частоты образования эмбриоидов 101
3.1.3. Показатели частоты регенерации всех проростков 105
3.1.4. Показатели частоты регенерации зеленых проростков 109
3.1.5. Влияние концентрации 2,4-Д в инициальной среде на эффективность андрогенеза in vitro 110
3.1.6. Влияние генотипического разнообразия на показатели андрогенеза in vitro у пшенично-ржаных замещенных линий Саратовская 29/ Онохойская, тритикале и линии пшеницы сорта Саратовская 29 112
3.2. Сравнение эффекта хромосом ржи 1R и 5R на особенности андрогенеза при культивировании пыльников пшенично-ржаных замещенных линий в зависимости от происхождения линий 113
3.3. Изучение особенностей каллусогенеза и регенерации в каллусной культуре незрелых зародышей пшенично-ржаных замещенных линий Саратовская 29/ Онохойская 118
3.4. Характеристика растений-гаметоклонов, полученных при культивировании пыльников замещенных пшенично-ржаных линий Саратовская 29/ Онохойская и линии пшеницы сорта Саратовская 29 123
Глава 4. Обсуждение 126
4.1. Особенности андрогенеза in vitro пшенично-ржаных замещенных линий 126
4.1.1. Влияние хромосом ржи на процесс андрогенного эмбриоидогенеза in vitro у пшенично-ржаных замещенных линий 127
4.1.2. Влияние сортового происхождения хромосом ржи 1R и 5R и типа замещения на показатели андрогенного эмбриоидогенеза у пшенично-ржаных замещенных линий 131
4.1.3. Влияние хромосом ржи на процесс регенерации проростков in vitro у пшенично-ржаных замещенных линий 133
4.2. Независимый генетический контроль признаков андрогенеза и саматического эмбриоидогенеза при культивировании пыльников и незрелых зародышей in vitro 135
4.3 Оценка стабильности гаплоидных и дигаплоидных растении-регенерантов, полученных при культивировании пыльников замещенных пшенично-ржаных линий in vitro 136
Заключение 141
Выводы 143
Список литературы 145
Приложение 174
