Введение
РАЗДЕЛ 1. Обзор литературы... 14
1.1. Иммуноглобулины: структура и функции... 14
1.1.1. Полиспецифичность как одно из свойств естественных -глобулинов... 16
1.2. Влияние различных физико-химических факторов на структуру и функции иммуноглобулинов... 18
1.2.1. Влияние хаотропных ионов на антигенсвязывающие функции иммуноглобулинов... 20
1.2.2. Влияние экстремальных значений рН на антигенсвязывающие функции иммуноглобулинов... 23
1.2.3. Влияние металлов на конформационные изменения иммуноглобулинов... 25
1.2.4. Влияние мочевины на конформацию иммуноглобулинов по данным дифференциальной спектрофотометрии... 28
1.2.5. Механизмы усиления активности иммуноглобулинов in vivo. Влияние активных форм кислорода, органических растворителей и липаз на антигенсвязывающие функции иммуноглобулинов... 30
1.3. Механизмы, лежащие в основе полиреактивной трансформации иммуноглобулинов... 37
РАЗДЕЛ 2. Объекты, материал и методы исследований... 39
2.1. Материал исследования 39
2.2. Получение иммуноглобулиновой фракции... 40
2.3. Получение полиреактивно трансформированных иммуноглобулинов ... 40
2.4. Электрофорез в полиакриламидном геле.
2.5. Твердофазный иммуноферментный анализ... 41
2.5.1. Взаимодействие антител с гликолипидными и белковыми антигенами... 41
2.5.2. Взаимодействие антител с денатурированной однонитевой и высокополимерной нативной ДНК... 42
2.5.3. Взаимодействие человеческого сывороточного альбумина с гликолипидными и белковыми антигенами... 43
2.5.4. Определение авидности антител... 44
2.5.5. Взаимодействие антител со стафилококковым белком А... 44
2.5.6. Конкурентное ингибирование гликолипидными и белковыми антигенами связывания антител с иммобилизованным липополисахаридом Escherichia coli K235... 45
2.5.7. Влияние обработки перйодатом натрия на взаимодействие антител с антигенами... 45
2.5.8. Влияние обработки боратом натрия на взаимодействие антител с антигенами ... 46
2.5.9. Вклад гидрофобных взаимодействий в связывание антител с антигенами... 47
2.5.10. Вклад электростатических взаимодействий в связывание антител с антигенами... 47
2.6. Ультрафиолетовая спектрофотометрия... 48
2.7. Коньюгирование... 49
2.7.1. Коньюгирование липополисахарида Escherichia coli K235 с флуоресцеинизотиоцианатом... 49
2.7.2. Коньюгирование суспензии Escherichia coli K30 и Staphilococcus aureus с флуоресцеинизотиоцианатом... 49
2.8. Проточная лазерная цитофлуориметрия...
2.8.1. Взаимодействие флуоресцентно меченного ЛПС с липополисахарид-связывающими рецепторами гранулоцитов и моноцитов периферической крови... 50
2.8.2. Определение фагоцитарной активности гранулоцитов периферической крови... 52
2.9. Люминол-зависимая хемилюминесценция... 53
РАЗДЕЛ 3. Результаты исследований... 55
3.1. Взаимодействие полиреактивно трансформированных иммуноглобулинов с гликолипидными и белковыми антигенами, а также с денатурированной однонитевой и высокополимерной нативной ДНК... 55
3.2. Влияние Tween-20, хлорида натрия, а также высушивание антигена на взаимодействие полиреактивно трансформированных иммуноглобулинов с гликолипидными и белковыми антигенами... 69
3.3. Влияние тиоцианата калия и мочевины на особенности трансформации и интенсивность взаимодействия полиреактивно трансформированных иммуноглобулинов, а также человеческого сывороточного альбумина с гликолипидными и белковыми антигенами ... 75
3.4. Изучение биологической активности полиреактивно трансформированных иммуноглобулинов... 81
3.5. Индивидуальныe особенности полиреактивной трансформации иммуноглобулинов в норме и при патологии... 90
Анализ и обобщение результатов исследования... 98
Выводы... 118
Практические рекомендации и внедрение результатов работы... 120
Перечень условных обозначений, символов, единиц, сокращений и терминов... 122
Список использованных источников... 125
