Введение
Литературный обзор 8
1.1 Характеристика стафилококков 7
1.2 Staphylococcus aureus и другие возбудители мастита коров 12
1.3 Санитарное значение золотистого стафилококка в молоке и молочных продуктах 17
1.4 Методы индикации Staphylococcus aureus
1.4.1 Микробиологические методы 21
1.4.2 Методы ДНК - диагностики 26
2 Собственные исследования 35
2.1 Материалы и методы 35
2.1.1 Методы идентификации Staphylococcus aureus 35
2.1.2 Методы определения Staphylococcus aureus в молоке и молочных продуктах 36
2.1.3 Метод дифференциального получения и индикации вегетативных и L - форм Staphylococcus aureus в молоке и молочных продуктах 39
2.1.4 Методика выделения ДНК из Staphylococcus aureus 40
2.1.5 Включение метки в ДНК методом ник-трансляции 41
2.1.6 Получение и мечение ДНК-зондов в реакции амплификации 44
2.1.7 Методика ДНК-гибридизации на мембранных фильтрах с ДНК, меченной тритием 45
2.1.8 Методика ДНК-гибридизации на мембранных фильтрах с ДНК, меченной биотином 46
2.1.9 Методика гибридизации колоний 47
2.1.10 Методика полимеразной цепной реакции 48
2.1.11 Амплификация ДНК методом "рассеянной" затравки 49
2.1.12 Статистическая обработка результатов 50 з
2.2 Результаты исследований 51
2.2.1 Разработка методики ускоренной индикации Staphylococcus aureus в молоке и молочных продуктах на основе полимеразной цепной реакции 51
2.2.2 Разработка методики ускоренной индикации Staphylococcus aureus в молоке и молочных продуктах с использованием генных зондов 55
2.2.3 Идентификация бактерий на основе гомологии ДНК для ускоренной оценки микробных контаминации молока от коров, больных маститом 66
2.2.4 Оценка методов ДНК-диагностики для быстрой индикации Staphylococcus aureus при мониторинге молока и молочных продуктов 70
3 Обсуждение результатов 76
Выводы 88
Предложения для практики 90
Список литературы
