Введение
1. ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРЫ И ФОТОДИНАМИЧЕСКОЕ АНТИМИКРОБНОЕ ДЕЙСТВИЕ
1.1. Катионныеазиниевые фотосенсибилизаторы. 22
1.2. Макроциклические фотосенсибилизаторы. 26
1.3 Аминолевулиповая кислота 33
2. БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ АТФ В "БЫСТРОЙ МИКРОБИОЛОГИИ.. 38
2.1. Методы "быстрой микробиологии" 38
2.2. Внутриклеточный атф как индикатор присутствия жизнеспособных клеток в различных образцах. 39
2.3. Физико-химические основы биолюминесцентного метода определения атф 40
2.4. Методы экстракции внутриклеточного атф 42
2.4.1. Экстрагенты, используемые в атф-метрии 42
2.5. Определение атф в различных образцах 47
2.5.1. Определение суммарного содержания (пула) атф 47
2.5.2. Определение соматического атф 47
2.5.3. Определение микробного атф 48
2.6. Определение специфической обсемененности образцов биолюминесцентным методом.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 56
1. ИСХОДНЫЕ ВЕЩЕСТВА И МАТЕРИАЛЫ 56
2. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 57
3. ИСПОЛЬЗОВАННАЯ АППАРАТУРА 58
4. МЕТОДИКИ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ 62
4.1 Получение и очистка биомассы 62
4.2. Измерение концентрацииатф 63
4.3. Исследование влияния фотовоздействия на уровень содержания атф в клетках. 67
4.4. Определение минимальных ингибир ующих концентраций фотосенсибилизаторов. 68
4.5. Прямое определение количества микробных клеток 69
4.6. Измерение биолюминесценции клеток е. in vivo. 70
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 72
1. ВЫТЕКАНИЕ ВНУТРИКЛЕТОЧНОГО АТФ ИЗ КЛЕТОК SACCHAROMYCES CEREVISIAE И ESCHERICHIA СОЫ LE 392 ПРИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОМ НА НИХ ВОЗДЕЙСТВИИ 72
1.1. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ ФОТОДИНАМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ АТФ В ИССЛЕДУЕМЫХ КЛЕТКАХ. 72
1.1.1. ОБЛУЧЕНИЕ ОБРАЗЦОВ, НЕ СОДЕРЖАВШИХ СЕНСИБИЛИЗАТОРА 72
1.1.2. ДЛИТЕЛЬНОСТЬ ТЕМНОВОЙ ИНКУБАЦИИ КЛЕТОК С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ 73
1.1.3. ПРИРОДА БУФЕРНОГО РАСТВОРА И РН СРЕДЫ 77
1.1.4. КОНЦЕНТРАЦИЯ СЕНСИБИЛИЗАТОРА 85
1.1.5. ДОЗА ОБЛУЧЕНИЯ И ПУТИ ЕЕ ДОСТИЖЕНИЯ 87
1.2. ВЛИЯНИЕ ФАЗЫ РОСТА НА ФОТОДИНАМИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ... 91
1.3. ФОТОДЕСТРУКЦИЯ КАК МЕТОД ЭКСТРАКЦИИ АТФ В БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ АТФ-МЕТРИИ 94
1.4. ВЛИЯНИЕ ФОТОДИНАМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ПРОНИЦАЕМОСТЬ МЕМБРАНЫ КЛЕТОК E.COLI PLR IN VIVO 97
2. ФОТОДИНАМИЧЕСКОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ НА ГРАМ- ОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ И ГРАМ-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ (НА ПРИМЕРЕЕ. COLI 0157:Н7 KL. MONOCYTOGENES LM 353) 103
2.1. БАКТЕРИЦИДНЫЙ ЭФФЕКТ MB, ТВО И TMPYP НА Е. COLI 0157 :Н7 ИГ MONOCYTOGENES LM 353 И МИНИМАЛЬНЫЕ ИНГИБИРУЮЩИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ. 103
2.2. ВЛИЯНИЕ ФОТОДИНАМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ ВНУТРИ- И ВНЕКЛЕТОЧНОГО АТФ В Е. COLI 0157 ;Н7 И L. MONOCYTOGENES LM 353 108
ВЫВОДЫ 121
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 122
