Введение
1. Регуляция экспрессии генов у дрожжей Saccharomyces cerevisiae в ответ на изменение состава среды (обзор литературы) 11
1.1. Регуляция транскрипции у дрожжей 11
1.1.1. Семейство транскрипционных факторов GATA 11
1.1.2. Регуляторные некодирующие РНК у дрожжей 15
1.2. Генетический контроль метаболизма азота и фосфора у дрожжей 28
1.2.1. Регуляция метаболизма азота у дрожжей 28
1.2.2. Регуляция метаболизма фосфора у дрожжей 53
1.2.3. Взаимодействия метаболических путей в клетке дрожжей 66
2. Материалы и методы 74
2.1. Основные обозначения 74
2.2. Штаммы дрожжей и бактерий 75
2.3. Плазмиды 76
2.4. Праймеры 78
2.5. Среды и условия культивирования штаммов 80
2.6. Методы 81
3. Результаты и обсуждение 84
3.1. Влияние источника азота на экспрессию гена РНОЗ и активность фермента КФ РпоЗр 84
3.2. Разработка системы селективного отбора мутантов с нарушенной регуляцией гена РНОЗ 86
3.3. Получение и анализ мутантов Ure+ у трансформантов YM954[pTLl] и [pSF28] 90
3.4. Анализ последовательности промотора гена РНОЗ 93
3.5. Поиск генов, компенсирующих эффект мутаций giibl и giib7 95
3.6. Идентификация гена, компенсирующего эффект мутации gubl 99
3.7. Определение нуклеотидной последовательности гена RSP5 у мутантного штамма 5-YM954 104
3.8. Выделение плазмид, содержащих фрагменты ДНК, компенсирующих эффект мутации gubl, из генных библиотек дрожжей 105
4. Заключение 108
Выводы 112
Список литературы 113
