Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 12
1.1. Цитокины: определение и классификация 12
1.2. Рецепторы цитокинов и трансдукция сигнала 13
1.3. Молекулы семейства ИЛ-1 14
1.3.1. Члены семейства ИЛ-1 и их свойства 14
1.3.2. Регуляция ИЛ-1 16
1.3.3. Функции ИЛ-1 17
1.4. Физиологические функции цитокинов в ЦНС 18
1.5. Регуляция цитокинов в ЦНС 22
1.6. Цитокины при патологии нервной системы 25
1.6.1. Цитокины при бактериальной инфекции ЦНС 26
1.6.2. Цитокины при вирусных инфекциях ЦНС 27
1.6.3. Цитокины при травматических и опухолевых повреждениях структур ЦНС 30
1.6.4. Цитокины при неиродегенеративных и аутоиммунных заболеваниях 32
1.7. Методические подходы для исследования экспрессии цитокинов 36
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 39
2.1. Экспериментальные животные 39
2.2. Культуры клеток 39
2.3. Вирус 39
2.4. Имплантация мозговых канюль 40
2.5. Стимуляция электрическим током 40
2.6. Обработка клеток ИЛ-1 и ростовыми факторами 41
2.7. Получение отдельных участков мозга 42
2.8. Выделение тотальной РНК 42
2.9. Анализ содержания специфических РНК 43
2.9.1. Синтез радиоактивных зондов 45
2.9.2. Определение радиоактивности РНК-зонда 47
2.9.3. Гибридизация 47
2.9.4. Защита от РНКазы 48
2.9.5. Электрофорез в полиакриламидном геле 49
2.10. Статистическая обработка экспериментальных данных 49
3. РЕЗУЛЬТАТЫ 51
3.1. Исследование синтеза мРНК цитокинов, их рецепторов, неиропептида Y. и проопиомеланокортина при вирусном энцефалите 51
3.1.1. Уровни экспрессии мРНК цитокинов в различных отделах мозга новорожденных животных, инфицированных вирусом болезни Борна 53
3.1.2. Анализ экспрессии мРНК компонентов рецепторного аппарата цитокинов при вирусном энцефалите 57
3.1.3. Исследование синтеза мРНК неиропептида Y и проопиомеланокортина 62
3.1.4. Корреляционный анализ различных параметров в контрольных и экспериментальных группах животных 64
3.2. Исследование экспрессии мРНК цитокинов, их рецепторов и компонентов нейроэндокринной системы в модели височной эпилепсии 67
3.2.1. Исследование экспрессии мРНК про- и противовоспалительных цитокинов в модели височной эпилепсии: 68
3.2.2. Изучение синтеза мРНК рецепторов цитокинов в модели электрического "киндлинга" 71
3.2.3. Анализ роли неиропептида Yu проопиомеланокортина в модели височной эпилепсии, вызванной электростимуляцией миндалины 74
3.2.4. Исследование влияния ИЛ-1(3 и ростовых факторов на синтез мРНК ФНО-а глиальными клетками 76
3.3. Изучение влияния хронического повышения концентрации ИЛ-10 в третьем мозговом желудочке на экспрессию мРНК цитокинов, их рецепторов, нейропептида Y и проопиомеланокортина в разных отделах мозга 78
3.3.1. Изучение экспрессии мРНК цитокинов у животных разного возраста в ответ на внутрижелудочковое введение ИЛ-1(3. 79
3.3.2. Исследование синтеза мРНК рецепторов цитокинов при внутри желудочковом введении ИЛ-1/3 животным разного возраста 82
3.3.3. Исследование экспрессии мРНК нейропептида Yu проопиомеланокортина при внутрижелудочковом введении рекомбинантного ИЛ-lfi.. 86
4. ОБСУЖДЕНИЕ 88
4.1. Экспрессия мРНК цитокинов, компонентов их рецепторного аппарата, нейропептида Y и ПОМК в модели вирусного энцефалита 88
4.2.Изменений синтеза мРНК цитокинов, их рецепторов и компонентов нейроэндокринной системы в модели височной эпилепсии 90
4.3. Изменение уровней мРНК цитокинов, их рецепторов, НП Y и ПОМК при хроническом внутри желудочковом введении ИЛ-ір 93
4.4. Роль цитокинов, их рецепторов, нейропептида Y и ПОМК при нейропатофизиологиях различной этиологии 95
ВЫВОДЫ 102
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 103
