Введение
Глава 1. Обзор литературы 9
1.1. Морфология тромбоцитов 9
1.2. Молекулярный базис изменения формы 10
1.3. Рассеяние света одиночными тромбоцитами 11
1.4. Обратная задача светорассеяния 12
1.5. Рассеяние света агрегатами тромбоцитов 13
Глава 2. Модернизация сканирующего проточного цитометра 16
2.1. Сканирующий проточный цитометр 16
2.2. Улучшение программного обеспечения сканирующего проточного цитометра
2.2.1. Запись данных 18
2.2.2. Считывание данных 21
2.2.3. Определение скорости потока и положения триггерного луча 23
2.2.4. Определение параметров D и V без использования теории Ми 26
Глава 3. Решение прямой и обратной задач светорассеяния для тромбоцитов и их агрегатов 29
3.1. Решение обратной задачи светорассеяния для одиночных тромбоцитов 29
3.1.1. Оптическая модель тромбоцита 29
3.1.2. Сравнение метода дискретных диполей и метода Т-матриц 30
3.1.3. Расчёт базы данных теоретических индикатрис 33
3.1.4. Глобальная оптимизация с использованием базы данных 34
3.1.5. Оценка погрешностей метода 35
3.1.6. Зависимость величины глобального минимума от размера базы данных 36
3.1.7. Тестирование базы данных 38
3.2. Рассеяние света агрегатами тромбоцитов: разделение мономеров и димеров 43
3.2.1. Приближение однократного рассеяния для агрегатов несферических частиц43
3.2.2. Интегрирование по азимутальному углу 44
3.2.3. Димеры полистирольных микросфер 45
3.2.4. Моделирование для димеров тромбоцитов 48
3.2.5. Приближение независимого рассеяния для индикатрис димеров тромбоцитов
3.2.6. Двумерные индикатрисы и внутренние поля 54
3.2.7. Агрегаты из большего числа клеток 56
3.2.8. Идентификация димеров 57
3.2.9. Поляризационные индикатрисы 58
Глава 4. Экспериментальные исследования 61
4.1. Выделение и активация тромбоцитов крови человека 61
4.2. Статическая характеризация тромбоцитов
4.2.1. Оценка достаточности размера базы данных 62
4.2.2. Ограничение по показателю преломления 63
4.2.3. Программное обеспечение для решения обратной задачи 64
4.2.4. Типичные результаты характеризации тромбоцитов 67
4.2.5. Распределение тромбоцитов по объёму 68
4.2.6. Измерения индикатрис тромбоцитов на другой длине волны 69
4.3. Активация тромбоцитов 71
4.3.1. Изменение формы 71
4.3.2. Кинетика активации 73
4.3.3. Объём и площадь поверхности при активации 75
4.3.4. Изучение активации с использованием флуоресцентных меток
4.4. Влияние антикоагулянтов на форму тромбоцитов 79
4.5. Агрегация тромбоцитов 81
Заключение 85
Список литературы 89
