Введение
Глава 1. Обзор литературы 12
1.1. Ишемия головного мозга: модели и механизмы 12
1.1.1. Типы ишемии головного мозга 12
1.1.2. Механизмы повреждения нервной ткани при глобальной и фокальной ишемии головного мозга 14
1.1.3. Экспериментальные модели ишемии головного мозга 18
1.2. Креатин. Его свойства, функции и применение 25
1.2.1. Биосинтез и распределение креатина в организме 25
1.2.2.Функции креатина и креатинфосфата в организме 28
1.2.3. Исследования нейропротекторных свойств креатина в условиях ишемии/гипоксии головного мозга , 33
1.2.3.1. Теоретически предпосылки применения креатина при ишемии и гипоксии головного мозга 33
1.2.3.2. Исследования нейропротекторных свойств креатина in vitro... 33
1.2.3.3. Исследования нейропротекторных свойств креатина in vivo 35
1.3. Неврологические и когнитивные нарушения при глобальной ишемии и инсультах головного мозга 41
1.3.1. Необходимость использования животных моделей и поведенческих тестов 41
1.3.2. Неврологические тесты для оценки последствий глобальной и фокальной ишемии мозга 42
1.3.2.1. Неврологические расстройства у людей, перенесших инсульт или глобальную ишемию головного мозга 42
1.3.2.2. Оценка функциональных нарушений с использованием неврологических шкал в клинике у людей и в эксперименте у животных 42
1.3.2.3. Неврологические последствия глобальной ишемии мозга у животных 46
1.3.2.4. Неврологические последствия фокальной ишемии мозга у животных 49
1.3.3. Исследование когнитивных нарушений, вызванных глобальной
и фокальной ишемией мозга 56
1.3.3.1. Когнитивные нарушения, вызываемые ишемией и инсультом 56
1.3.3.2. Исследование обучения и памяти у животных в водном тесте Морриса 59
1.3.3.3. Влияние глобальной ишемии мозга на обучение животных в водном тесте Морриса 62
1.3.3.4. Влияние фокальной ишемии мозга на обучение животных в водном тесте Морриса 69
Глава 2. Методика 75
2.1. Животные 75
2.2. Хирургические процедуры 75
2.2.1. Маркировка животных 75
2.2.2. Индуцирование глобальной и фокальной ишемии головного мозга 77
2.2.2.1. Индуцирование глобальной ишемии головного мозга 77
2.2.2.2. Индуцирование фокальной ишемии головного мозга 79
2.2.3. Процедура введения исследуемых растворов 81
2.2.2.1. Имплантация интрацеребровентрикулярной канюли и интрацебровентрикулярная инфузия исследуемых растворов 81
2.2.2.2. Внутрибрюшинная инъекция производных креатина 83
2.2.3. Эвтаназия животных 84
2.3. Поведенческое тестирование 84
2.3.1. Выбор схемы поведенческого исследования 1 84
2.3.2. Исследование когнитивных нарушений в пространственной версии водного теста Морриса 86
2.3.3. Неврологическое тестирование 90
2.3.3.1. Оценка последствий глобальной ишемии головного мозга с использованием девятибалльной неврологической шкалы Комбса и ДАлеси... 90
2.3.3.2. Оценка последствий фокальной ишемии с использованием специализированных неврологических шкал 92
2.3.4. Статистическая обработка и представление данных 95
Глава 3. Результаты и обсуждение 98
3.1. Влияние креатина на неврологические нарушения, вызванные глобальной ишемией головного мозга у крыс 98
3.1.1. Базовый уровень неврологических способностей у крыс 98
3.1.2. Неврологические нарушения, вызываемые ГИМ у крыс 99
3.1.3. Влияние процедур и.ц.в. канюлирования и и.ц.в. инфузии per se на неврологический статус животных 101
3.1.4. Профилактическая эффективность креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных ГИМ 106
3.1.4.1. Влияние предварительной и.ц.в. инфузии 50 мМ раствора креатина 106
3.1.4.2. Влияние предварительной и.ц.в. инфузии 100 мМ раствора креатина 108
3.1.4.3. Влияние глицерина на неврологический статус животных до и после ГИМ - контроль осмотических эффектов креатина 110
3.1.5. Терапевтическая эффективность креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных ГИМ 113
3.2. Влияние креатина на когнитивные нарушения, вызванные глобальной ишемией головного мозга у крыс 115
3.2.1. Нарушения обучения в водном тесте Морриса, вызываемые ГИМ у крыс 115
3.2.2. Влияние длительной и.ц.в. инфузии исследуемых растворов perse на когнитивные функции у крыс 118
3.2.3. Профилактическая эффективность креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных ГИМ 120
3.2.3.1. Влияние предварительной и.ц.в. инфузии 50 мМ раствора креатина на обучение крыс в водном тесте Морриса после ГИМ 120
3.2.3.2. Влияние предварительной и.ц.в. инфузии 100 мМ раствора креатина на обучение крыс в водном тесте Морриса после ГИМ 122
3.2.3.3. Влияние предварительной и.ц.в. инфузии раствора глицерина на обучение крыс в водном тесте Морриса после ГИМ - контроль возможных осмотических эффектов креатина 124
3.2.4. Терапевтическая эффективность креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных ГИМ 126
3.3. Влияние новых синтетических производных креатина на неврологические и когнтивные нарушения, вызванные глобальной ишемией мозга у крыс 129
3.3.1. Профилактическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных ГИМ 129
3.3.2. Профилактическая эффективность бензилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных ГИМ 131
3.3.3. Профилактическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных ГИМ 132
3.3.4. Профилактическая эффективность бензилового эфира креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных ГИМ 135
3.3.5. Сравнение профилактической эффективности глицерилового и бензилового эфиров креатина в отношении неврологических и когнитивных нарушений, вызванных ГИМ 137
3.4. Влияние производных креатина на неврологические нарушения, вызванные фокальной ишемией головного мозгау крыс 138
3.4.1. Неврологические нарушения, вызываемые хронической ФИМ... 138
3.4.2. Профилактическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных хронической ФИМ 141
3.4.3. Терапевтическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных хронической ФИМ 143
3.4.4. Профилактическая эффективность бензилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных хронической ФИМ 145
3.4.5. Терапевтическая эффективность бензилового эфира креатина в отношении неврологических нарушений, вызванных хронической ФИМ 147
3.5. Влияние производных креатина на когнитивные нарушения, вызванные хронической фокальной ишемией головного мозга у крыс 150
3.5.1.Когнитивные нарушения, вызываемые хронической ФИМ 150
3.5.2. Профилактическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных хронической ФИМ 153
3.5.3. Терапевтическая эффективность глицерилового эфира креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных хронической ФИМ 154
3.5.4. Профилактическая эффективность бензилового эфира креатина в отношении когнитивных нарушений, вызванных хронической ФИМ 156
3.5.5. Терапевтическая эффективность бензилового эфира Кр в отношении когнитивных нарушений, вызванных ФИМ 158
Заключение 161
Выводы 168
Список литературы 170
