Введение
2. Обзор литературы 15
2.1. Морфология печени 15
2.1.1. Структурно-функциональные единицы печени млекопитающих 15
2.1.2. Паренхиматозные клетки печени 17
2.1.3. Синусоидные клетки печени 18
2.1.3.1. Эндотелиальные клетки 20
2.1.3.2. Клетки Купфера 20
2.1.3.3. Ямочные клетки (Pit cells) 21
2.1.3.4. Морфо-функциональные характеристики перисинусоидальных клеток 22
2.2. Стволовые клетки печени 27
2.2.1. Коммитированные стволовые клетки печени 29
2.2.1.1. Гепатоциты 29
2.2.1.2. Малые гепатоцитоподобные прогениторные клетки 31
2.2.2. Потенциальные стволовые клетки - овальные клетки 31
2.2.3. Собственно стволовые клетки печени 37
2.2.4. Мультипотентные прогениторные клетки печени 40
2.2.5. Внепеченочные стволовые клетки и печень 43
2.2.5.1. Мезенхимальные стволовые клетки 43
2.2.5.2. Гемопоэтические стволовые клетки 44
2.3. Модели регенерации печени 47
2.3.1. Хирургические модели 48
2.3.1.1. Частичная гепатэктомия 49
2.3.1.2. Перевязка ветвей воротной вены 50
2.3.2. Модели токсического поражения печени 51
2.3.2.1. Повреждение нитратом свинца 52
2.3.2.2. Повреждение четыреххлористым углеродом 52
2.3.2.3. Повреждение галактозамином 53
2.3.2.4. Повреждение CC14-AAF 54
2.3.2.5. Повреждение фураном 54
2.3.2.6. Повреждение аллиловым спиртом 55
2.3.2.7. Повреждение дипином 55
2.3.3. Химические модели гепатоканцерогенеза 57
2.3.3.1. Повреждение ацетиламинофлуореном (AAF) 57
2.3.3.2. Повреждение диэтилнитрозамином 58
2.3.3.3. "Solt-Farber" модель 58
2.5.3.1. Холин-дефицитная модель 60
2.4. Регенерация печени после ЧГ 60
2.4.1. Триггеры регенерации печени 62
2.4.2. Ранние изменения, развивающиеся после ЧГ 65
2.4.3. Прогрессия Gl-фазы и пролиферация клеток печени 68
2.4.4. Завершение регенерации печени после ЧГ 75
3. Материалы и методы 78
3.1. Объекты исследования 80
3.2. Гистологические и иммуногистохимические методы исследования 82
3.2.1. Депарафинирование и регидратация парафиновых срезов 82
3.2.2. Окрашивание гематоксилин-эозином 82
3.2.3. Окрашивание парафиновых срезов печени крысы антителами против PCNAHCX-ГМА 82
3.2.4. Окрашивание парафиновых срезов печени крысы антителами к десмину, цитокератину № 19 83
3.2.5. Окрашивание парафиновых срезов печени крысы антителами к макрофагальному антигену 84
3.2.6. Двойное иммуногистохимическое окрашивание парафиновых срезов печени антителами против PCNA и десмина 84
3.2.7. Двойное иммуногистохимическое окрашивание парафиновых срезов печени антителами против PCNA и макрофагального антигена 86
3.2.8. Двойное иммуногистохимическое окрашивание парафиновых срезов печени антителами против c-kit и десмина 86
3.3 Морфометрия 87
3.3.1. Определение размера печеночных долек 88
3.3.2. Определение числа десмин-позитивных перисинусоидальных клеток 89
3.3.3. Определение числа пролиферирующих клеток 89
4. Результаты и обсуждение 91
4.1. Макроскопические изменения регенерирующей печени 91
4.2. Морфологические изменения регенерирующей печени при окраске на гематоксилин-эозин 91
4.2.1. Просвет синусоидов 93
4.2.2. Жировой стеатоз 94
4.2.3. Изменения размеров долек печени 95
4.2.4. Изменение площади печеночных долек 96
4.3. Пролиферативные процессы в печени после ЧГ 98
4.3.1. Экспрессия PCNA в гепатоцитах 98
4.3.2. Экспрессия PCNA в холангиоцитах 102
4.3.3. Экспрессия PCNA в синусоидных клетках 106
4.4. Перисинусоидальные клетки после ЧГ 108
4.4.1. Эспрессия десмина перисинусоидальными клетками 108
4.4.2. Экспрессия альфа-гладкомышечного актина 115
4.5. Реакция внутрипеченочных желчных протоков
и овальных клеток на ЧГ 123
4.6. Клетки Купфера при регенерации печени после ЧГ 126
4.6.1. Экспрессия макрофагального антигена 127
4.6.2. Двойное иммуногистохимическое окрашивание антителами к макрофагальному антигену и PCNA 129
4.7. Активация стволового компартмента 130
4.7.1. Экспрессия C-kit в печени после ЧГ 131
4.7.2. Двойное иммуногистохимическое окрашивание антителами к C-kit и десмину 134
5. Заключение 141
6. Выводы 147
7. Практические рекомендации
