Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1. Современные представления о патогенезе аутоиммунного тиреоидита 12
1.2. Атитела к ДНК и их значение при аутоиммунной патологии 24
1.3. Открытие природных аутоантител с функциональным каталитическим ресурсом 29
1.4. Новый метод определения аутоантител к ДНК с использованием пьезокварцекого биосенсора 35
1.5. Использование атомно-силовой микроскопии в биологии и медицине 38
ГЛАВА 2. Материалы, объем и методы исследований 42
2.1. Объем исследования 42
2.2. Определение содержания антител к нативной ДНК и денатурированной ДНК в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа 44
2.3. Метод определения антител к нативной ДНК в сыворотке крови с использованием пьезокварцевого биосенсора 45
2.3.1. Анализ с помощью пьезокварцевого биосенсора в газовом режиме 46
2.3.2. Иммунизация кроликов комплексом ДНК-ДНКаза 1 47
2.3.3. Определение антител к нативной ДНК с использованием пьезокварцевого биосенсора в проточно-инжекционном режиме 49
2.4. Определение ДНК-гидролизующей активности сывороток крови больных аутоиммунным тиреоидитом, системной красной волчанкой и здоровых лиц 51
2.5. Изучение ДНК-гидролизующей активности антител к нативной ДНК, выделенных из сыворотки крови больных аутоиммунным тиреоидитом 53
2.5.1. Выделение антител к нативной ДНК из сыворотки крови больных АИТ 53
2.5.2. Визуализация взаимодействия ДНК и антител методом атомно-силовой микроскопии 55
2.6. Статистическая обработка результатов 56
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 59
3.1. Клиническая характеристика больных аутоиммунным тиреоидитом 59
3.2. Определение антител к нативной и денатурированной ДНК класса IgG в сыворотке крови больных аутоиммунным тиреоидитом методом иммуноферментного анализа 68
3.3. Определение антител к нативной ДНК класса IgM в сыворотке крови больных аутоиммунным тиреоидитом методом иммуноферментного анализа 75
3.4. Определение антител к нативной ДНК в сыворотке крови при помощи пьезокварцевого биосенсора 77
3.4.1. Определение антител к нДНК с использованием пьезокварцевого биосенсора в газовом режиме 77
3.4.1.1. Определение антител к нДНК в сыворотке крови кроликов 77
3.4.1.2. Определение антител к нДНК в сыворотке крови больных аутоиммунным тиреоидитом, системной красной волчанкой и здоровых лиц 78
3.4.2. Определение антител к нДНК с использованием пьезокварцевого биосенсора в проточно-инжекционном режиме 81
3.5. Исследование ДНК-гидролизующей активности сывороток крови больных аутоиммунным тиреоидитом, системной красной волчанкой и здоровых лиц 83
3.6. Исследование ДНК-гидролизующей активности антител к нативной ДНК, выделенных из сыворотки больных аутоиммунным тиреоидитом, методом атомно-силовой
микроскопии 87
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов исследований 93
Выводы 119
Практические рекомендации 120
Список литературы
