Введение
Глава 1. Обзор литературы 9
1.1. Escherichia coli как условно-патогенный микроорганизм 9
1.1.1. Типы адгезинов Е. coli 9
1.1.1.1. Маннозочувствительные фимбрии или фимбрии 1 типа Е. coli 11
1.1.1.2. Маннозоустойчивые фимбрии Е. coli 13
1.2. Общая характеристика Тамм-Хорсфалл протеина 15
1.2.1. Структура Тамм-Хорсфалл протеина 17
1.2.1.1 . Аминокислотный состав Тамм-Хорсфалл протеина 19
1.2.1.2. Углеводный состав Тамм-Хорсфалл протеина 19
1.2.2. Способы идентификации и выделения Тамм-Хорсфалл протеина 22
1.3. Роль Тамм-Хорсфалл протеина в развитии восходящей уроинфекции 23
1.3.1. Взаимодействие Е. coli, несущих Р-фимбрии с Тамм-Хорсфалл протеином 24
1.3.2. Взаимодействие Е. coli, несущих фимбрии 1 типа с Тамм-Хорсфалл протеином 25
1.3.3. Взаимодействие Е. coli, несущих S-фимбрии с Тамм-Хорсфалл протеином 26
1.3.4. Взаимодействие Е. coli, несущих адгезии 075Х
с Тамм-Хорсфалл протеином 27
1.4. Биологическая роль ТХП 28
1.4.1. Исследование Тамм-Хорсфалл протеина на мышиных моделях 29
1.5. Патологическое значение Тамм-Хорсфалл протеина 30
1.5.1. Количественное содержание Тамм-Хорсфалл протеина в норме и при патологии 30
1.5.1.1. Экскреция Тамм-Хорсфалл протеина при трансплантации почки 31
1.5.2 Антителопродукция к Тамм-Хорсфалл протеину 33
1.5.2.1. Возрастная зависимость антителообразования к Тамм-Хорсфалл протеину 34
1.5.2.2. Антителопродукция к Тамм-Хорсфалл протеину при патологиях 35
1.5.3. Феномен Тамм-Хорсфалл протеина при трансплантации почки 37
Глава 2. Материалы и методы 39
2.1. Материалы 39
2.1.1. Штаммы микроорганизмов 39
2.1.2. Клинический материал 41
2.1.3. Среды, антибиотики и реактивы, используемые в работе 42
2.1.3.1. Среды 42
2.1.3.2. Антибиотики 42
2.1.3.3. Реактивы 42
2.1.3.4. Экспериментальные животные 43
2.1.3.5. Оборудование 43
2.2. Методы исследования . 44
2.2.1. Выделение Тамм-Хорсфалл протеина 44
2.2.2. Получение иммунных сывороток 45 2.2.3.Получение антигенного эритроцитарного диагностикума 46
2.2.4. Исследование бактериальной адгезии 48
2.2.4.1. Исследование адгезии Е. соїі в реакции агглютинации дрожжей 48
2.2.4.2. Реакция нейтрализации агглютинации дрожжей 49
2.2.4.3. а,б Реакция торможения агглютинации дрожжей 49
2.2.4.4. Исследование агглютинации эритроцитов барана 50
2.2.4.5. реакция нейтрализации эритроцитов барана 51
2.2.4.6. Реакция торможения агглютинации эритроцитов барана 52
2.2.4.7. исследование агглютинации эритроцитов морской свинки 52
2.2.4.8. Реакция нейтрализации эритроцитов морской свинки 53
2.2.4.9. Реакция торможения агглютинации эритроцитов морской свинки 53
2.2.5. Методы постановки серологических и иммунохимических реакций 54
2.2.5.1. Реакция агглютинации с иммунной сывороткой 54
2.2.5.2. Реакция торможения Тамм-Хорсфалл протеина агглютинации иммунной сыворотки 54
2.2.5.3. Определение концентрации ТХП в образцах мочи
по реакции нейтрализации антител 55
2.2.5.4. Реакция нейтрализации антител нативной мочой 55
2.2.5.5. Реакция преципитации в геле 56
2.2.5.6. Иммуноэлектофорез 57
2.2.6. Математическая и статистическая обработка данных 57
Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение
3.1. Адгезия Е. coli на эпителиальные клетки мочевыводящего тракта и роль ТХП как протективного фактора 58
3.1.1. Изучение адгезинов музейных штаммов Е. coli в
сравнении с клиническими изолятами. Блокирующее действие ТХП на адгезию Е. coli к клеткам-мишеням 61
3.2. Тест-система для определения Тамм-Хорсфалл протеина 68
3.2.1. Тестирование иммунной сыворотки в РИД 68
3.2.2. Исследование активности сывороток 72
3.2.3. Исследование активности антигенного эритроцитарного диагностикума 72
3.3. Исследование продукции аутоаитител к Тамм-Хорсфалл протеину и влияние их на изменение уровня ТХП в моче 73
3.3.1. Исследование антителопродукции к Тамм-Хорсфалл протеину у доноров и реципиентов почечного трансплантата 74
Заключение 83
Выводы 86
Список публикаций по материалам диссертации 87
Список литературы 88
