Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 5
Получение растений, устойчивых к колорадскому жуку на основе
трансформации геном вт bacillus thuringienSIS 5
1.1. Биологические особенности bacillus thuringIENSIS. 5
1.2. Доменная организация эндотоксИНОВ 9
1.3. Механизм действия эндотоксинов bacillus thuringieNSIS 11
1.4. Применение культуры в. thuringiensis в качестве инсектицида 13
1.5. Клонирование и экспрессия гена, кодирующего токсин В. THURINGIENSIS. 15
1.6. Изучение функциональной роли а-спирллЕй 17
1.7. Генная инженерия генов токсинов в. thuringiensis 19
1.8. Введение cry генов в геном растений /25
1.9. Придание устойчивости растениям посредством бактериального гена изопентенил-трансфер азы (ірт) 32
1.10. Гены хозяйской специфичности агробактерий 32
ГЛАВА 2. материал и методы 46
2.1. Материал 46
2.2. Методы 53
Агробактериальная трансформация в оптимальных для регенерации условиях 53
2.2.1. Поддержание растительного материала 53
2.2.2. Подбор сред для регенерации и характеристика сортов картофеля по регенерационной способности . 54
2.2.3. Получение трансгенных растений картофеля 58
2.2.4. Выделение растительной ДНК. 60
2.2.5. Выделение ДНК агробактерий 60
2.2.6. Полимеразная цепная реакция 61
2.2.7. Оценка устойчивости картофеля к колорадскому картофельному
оюуку. 61
2.2.8. Статистическая обработка результатов. 62
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение 63
3.1. Характеристика сортов картофеля in vitro по регенерлционпои
способности 63
3.1.1. Морфофизиологическая характеристика каллусов in vitro 63
3.1.2. Регенерация побегов на клубневых эксплантах in vitro 72
3.2. Получение трансгенных растений картофеля с генами вт и ірт 80
3.3. Анализ трансгенных линий картофеля с генами вт и ірт на устойчивость к колорадскому картофельному жуку.: 89
Заключение 98
Выводы 104
Приложение 119
