Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
1.1. Общие сведения о ящуре 10
1.2. Экономический ущерб при ящуре 12
1.3. Источник инфекции при ящуре 13
1.3.1. Продукты убоя как источник распространения ящура 13
1.3.2. Роль вирусоносительства в эпизоотологии ящура 14
1.3.3. Вирусоносительство у вакцинированных животных 16
1.4. Наличие и сохраняемость вируса ящура в продуктах убоя животных 19
1.4.1. Патоморфологические изменения при ящуре 19
1.4.2. Наличие вируса ящура в продуктах убоя в различные периоды заболевания 22
1.4.3. Сохраняемость вируса ящура в продуктах убоя животных 25
1.5. Обнаружение вируса ящура в продуктах убоя 27
1.5.1. Подготовка проб к исследованиям! 28
1.5.2. Методы лабораторной диагностики ящура 35
1.6. Заключение по обзору литературы 41
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 43
2.1. Материалы и методы 43
2.1.1. Штаммы вируса ящура 43
2.1.2. Лабораторные и сельскохозяйственные животные 43
2.1.3. Клеточные культуры и питательные среды 43
2.1.4. Подготовка материала к исследованию 44
2.1.5. Методы исследования патологического материала 48
2.1.5.1. Полимеразная цепная реакция 48
2.1.5.2. Иммуноферментный анализ 52
а) выявление специфических противоящурных антител 52
б) определение постинфекционных противоящурных антител к неструктурным полипротеинам вируса ящура 53
в) выявление антигена вируса ящура в ИФА 53
2.1.5.3. Реакция микронейтрализации 54
2.1.5.4. Вирусовыделение с последующей идентификацией типовой принадлежности вируса 54
2.1.5.5 Постановка РСК для определения антигенного родства вируса ящура 55
2.1.6. Статистическая обработка данных 56
2.2. Результаты собственных исследований 57
2.2.1. Отбор проб патологического материала и продуктов убоя 57
2.2.2. Подбор оптимального метода вирусовыделения 58
2.2.3. Подготовка проб для осуществления прямой индикации антигена вируса ящура в ИФА 59
2.2.3.1. Изучение эффективности методов очистки тканевой суспензии 59
2.2.3.2. Изучение эффективности методов концентрирования 61
2.2.3. Обнаружение возбудителя в различных тканях и органах с применением ПЦР 63
2.2.4. Сравнительные исследования продуктов убоя до и после их "созревания" ...65
2.2.5. Исследование продуктов убоя после экспериментального заражения животных вирусом ящура типа О №1964/Монголия/2004 68
2.2.5.1. Иммунобиологические исследования эпизоотического штамма типа О №1964/Монголия/2004 69
2.2.5.2. Исследование продуктов убоя в различные сроки после заражения 74
2.2.6. Сравнительная оценка методов обнаружения возбудителя ящура в продуктах убоя 80
2.2.7. Выявление противоящурных антител в органах и тканях вакцинированных и невакцинированных животных после экспериментального заражения 82
2.2.7.1. Обнаружение антител к неструктурным полипротеинам вируса ящура 87
2.2.8. Сравнение показателей обнаружения возбудителя ящура и противоящурных антител 89
2.2.9. Результаты исследования продуктов убоя от зараженных вирусом ящура животных с различным иммунным статусом 90
2.2.10. Индикация возбудителя в продуктах убоя свиней 94
2.2.10.1. Изменение величины рН в процессе созревания мяса свинины 98
2.2.11. Исследование пищеводно-глоточной жидкости на наличие генома вируса ящура, антигена и противоящурных антител 101
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 105
4. ВЫВОДЫ 117
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 119
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 120
ПРИЛОЖЕНИЯ 144-147
