Введение
Глава 1. Обзор литературы 12
1.1 Глюкокортикоиды и их влияние на развитие организма. 12
1.1.1 Рецепторы глюкокортикоидов 12
1.1.2 Экспрессия глюкокортикоидных рецепторов в головном мозге 18
1.1.3 Генетические модели для изучения функции глюкокортикоидных рецепторов 19
1.1.4 Влияние глюкокортикоидов на развитие головного мозга. 22
1.2 Апоптоз и его роль в развитии организма. 23
1.3 Особенности некроза, аутофагии и апоптоза 26
1.3.1 Некроз 26
1.3.2 Аутофагия 28
1.3.3 Апоптоз. 31
1.3.4 Молекулярные механизмы апоптоза 32
1.3.5 Основные пути запуска апоптоза. 38
1.3.6 Апоптоз в развивающейся ЦНС. 39
1.3.7 Участие каспазы-3 и BH3 белков в синаптической пластичности. 40
1.3.8 Другие формы клеточной гибели. 41
1.4 Клеточная гибель в результате эксайтотоксичности. 43
1.4.1 Рецепторы глутамата. 43
1.4.2 Смешанные формы клеточной гибели при эксайтотоксичности 45
1.4.3 Роль внутриклеточного баланса ионов в механизме эксайтотоксичной гибели клеток. 46
1.4.4 Роль митохондрий в эксайтотоксической гибели клеток. 47
1.4.5 Эндоплазматический ретикулум и эксайтотоксичность 48
1.4.6 Роль лизосом в эксайтотоксической гибели клеток. 49
1.5 Влияние глюкокортикоидов на апоптоз 50
1.6 Гипоксия и глюкокортикоиды. 53
1.6.1 Транскрипционные факторы индуцируемые гипоксией HIF. 53
1.6.2 Гипоксия и глюкокортикоиды. 54
Глава 2. Материалы и методы. 56
2.1 Экспериментальные животные. 56
2.2 Введение препаратов и воздействие гипоксией 56
2.3 Выделение образцов ткани мозга и приготовление его срезов для гистологического анализа. 57
2.4 Окраска по Нисслю. 57
2.5 Иммуногистохимическое окрашивание срезов головного мозга. 58 2.6 TUNEL-метод 60
2.8 Микроскопия 60
2.7 Выделение РНК. 61
2.8 Оценка уровня мРНК каспазы-3 и c-fos методом ПЦР-РВ. 61
2.9 Иммуноблот 62
2.10 Статистическая обработка результатов. 63
Глава 3. Результаты. 64
3.1 Экспрессия глюкокортикоидных рецепторов в мозге неонатальных крысят. 64
3.2 Влияние дексаметазона и гипоксии на общее развитие и морфологию головного 72
3.2.1 Вес тела после введения дексаметазона и гипоксии 72
3.2.2 Морфология мозга после введения дексаметазона 73
3.3 Влияние дексаметазона и гипоксии на апоптоз клеток головного мозга. 76
3.3.1 Морфология мозга после введения дексаметазона и эпизода гипоксии. 76
3.3.2 Экспрессия активной каспазы-3 после введения дексаметазона и гипоксии через 120 часов после воздействия. 77
3.4 Острое действие глюкокортикоидов на активность клеток гиппокампа и апоптоз клеток
дорзального субикулума. 80
3.4.1 Экспрессия каспазы-3 в гиппокампальной формации через 6ч. после введения дексаметазона. 80
3.4.2 Количество клеток позитивных по реакции на фрагментированную ДНК (TUNEL) в дорзальном субикулуме через 6ч. после введения дексаметазона. 82
3.4.3 Экспрессия каспазы-3 в неокортексе через 6ч. после введения дексаметазона. 84
3.4.4 Экспрессия гена раннего ответа c-fos в первые часы после введения гормона. 87
3.5 Влияние блокады рецепторов глутамата на индуцируемую дексаметазоном гибель клеток
субикулума 91
3.5.1 Количество клеток позитивных по активной каспазе-3 в дорзальном субикулуме через 6ч. после введения дексаметазона и анатагониста глутаматных рецепторов мемантина 91
3.5.2 Количество клеток позитивных по реакции TUNEL в дорзальном субикулуме через 6ч. после после введения дексаметазона и анатагониста глутаматных рецепторов мемантина. 94
Глава 4.Обсуждение. 97
Выводы 108
Библиография
