Введение
1 CLASS Обзор литератур CLASS ы 10
1.1 Эколого-биологические особенности Bacillus thuringiensis . 10
1.1.1 Систематическое положение В. thuringiensis 10
1.1.2 История описания вида В. thuringiensis и его разнообразия 11
1.1.3 Внутривидовая классификация В. thuringiensis . 12
1.1.4 Распространение В. thuringiensis 15
1.1.5 Характеристика клеточных и культуральных признаков В. thuringiensis 16
1.1.6 Особенности жизненного цикла 17
1.1.7 Токсины В. thuringiensis- 20
1.1.8 Взаимоотношения паразит-хозяин " 23
1.2 Изменчивость у В. thuringiensis 26
1.2.1 Мутационная изменчивость 26
1.2.2 Рекомбинационная изменчивость 27
1.2.3 Диссоциативная изменчивость 29
2 Материал и методы исследования 38
2.1 Исходные штаммы и условия культивирования 38
2.1.1 Исходные штаммы 38
2.1.2 Условия культивирования 38
2.2 Флуктуационный тест Луриа-Дельбрюка 39
2.3 Определение параметров роста периодической культуры и динамики возникновения морфологических вариантов . 40
2.4 Определение выживаемости клеток в краткосрочных экспериментах 41
2.4.1 Выживаемость клеток при 40С 41
2.4.2 Исследование влияния химических инсектицидов . 42
2.4.3 Обработка клеток УФ-лучами 42
2.5 Анализ диагностических признаков R-форм 43
2.6 Исследование капсулы 46
2.7 Подвижность и хемотаксис 46
2.7.1 Приготовление вставок 46
2.8 Метод получения спонтанных мутантов, устойчивых к антибиотикам 47
2.9 Совместное культивирование штаммов 48
3 CLASS Результат CLASS ы 50
3.1 Исследование природы диссоциации у В. thuringiensis с помощью флуктуационного теста и анализа роста периодических культур 50
3.1.1 Особенности встречаемости R-вариантов в тесте Луриа-Дельбрюка у штаммов 49 и 2002 53
3.1.2 Особенности появления R-форм в периодических культурах при оптимальных условиях культивирования 60
3.1.3 Частота возникновения R-форм в оптимальных условиях 62
3.2 Влияние факторов среды на рост и динамику возникновения R-вариантов 64
3.2.1 Характер размножения и встречаемости R-вариантов в условиях культивирования при повышенном значении рН среды 64
3.2.2 Характер размножения и встречаемости R-вариантов в условиях культивирования при повышенной температуре 68
3.2.3 Действие УФ-лучей на возникновение R-вариантов 70
3.3 Скорость роста R-вариантов при оптимальной (28С) и повышенной (40С) температурах культивирования 72
3.4 Сравнительный анализ устойчивости к повышенной температуре клеток исходных S и R-вариантов 74
3.5 Выживаемость R-форм под воздействием УФ-лучей 76
3.6 Влияние химических инсектицидов на выживаемость и изменчивость S и R-вариантов 77
3.7 Сравнительный анализ R и S-форм по диагностически значимым признакам 80
3.7.1 Физиолого-биохимические свойства S и R-вариантов . 81
3.7.2 Отношение S и R-вариантов к антибиотикам пеницил-линового ряда 85
3.7.3 Споро-кристаллообразование у R-вариантов, возникших спонтанно и под действием факторов среды . 88
3.8 Анализ свойств, предшествующих споруляции 92
3.8.1 Исследование подвижности и хемотаксических реакций S и R-вариантов 92
3.8.2 Исследование способности к обмену генетической информацией между S и R-вариантами 98
3.9 Исследование обратного R—>S перехода 107
4 Обсуждение 116
Выводы 128
Список литературы 129
Приложения 151
