Введение
1 Материал и методы исследования 16
1. Объект исследования 16
2. Получение зародышей мышей 16
3. Рентгеновское облучение 16
4. Гамма-облучение 16
5. Трансплантация кроветворной ткани и кроветворные колонии в селезенке 16
6. Определение самообновления кое-с 16
7. Н3-тимидиновое и н3-уридиновое «самоубийство» 17
8. Оксимочевиновое «самоубийство» 17
9. Обработка антибиотиками 18
10. Обработка 5-фторурацилом (5-фу) 18
11. Обработка дипином 18
12. Анемия 18
13. Эктопическая трансплантация 18
14. Культивирование клеток костного мозга 19
15. Получение кроличьей антисыворотки к головному мозгу мыши (касмм) и экспозиция с ней кроветворных клеток 19
16. Обработка результатов 20
2 Обзор литературы 21
1. Фенотипическая и функциональная характеристика кроветворных стволовых клеток 22
2. Пролиферативный статус кроветворных стволовых клеток 29
2.1. Исследование кроветворных стволовых клеток с помощью мультипараметрического анализа 29
2.2. Содержание РНК 31
2.3. Фенотипические различия покоящихся и пролиферирующих КСК 32
2.4. Положение КСК в клеточном цикле и способность к репопуляции 33
2.5. Исследование пролиферативной активности КСК с помощью цитотоксических препаратов 34
2.6. Сочетанный эффект цитотоксических препаратов и цитокинов 38
2.7. Кинетика клеточного цикла КСК 39
3. Родоначальные кроветворные клетки, образующие кроветворные колонии в селезенке (кое-с) 42
3.1. Метод селезеночных колоний и его применение для исследования популяции родоначальник клеток 42
3.2. Фенотипическая характеристика КОЕ-С 43
3.3. Сравнительная характеристика КОЕ-С, образующих ранние и поздние селезеночные колонии 45
3.3.1. Экспрессия антигенов клеточной поверхности 46
3.3.2. Пролиферативный статус КОЕ-С и регуляция их пролиферации 47
3.3.3. Чувствительность к цитотоксическим агентам 49
3.4. Положение КОЕ-С в гистогенетическом ряду кроветворных клеток 51
4. Кроветворное микроокружение и гемопоэз 57
4.1. Характеристика кроветворного микроокружения и его регуляторной функции 57
4.2. Мезенхимные (стромальные) стволовые клетки 60
4.2.1. Фенотипическая и функциональная характеристика мезенхимных (стромальных) стволовых клеток 60
4.2.2. КОЕ-Ф - стромальная стволовая клетка 61
4.2.3. Эктопическая трансплантация костного мозга в виде фрагмента 62
4.2.4. Гистогенетические отношения МСК и КСК 64
4.2.5. МСК и мезенхимные сосудистые гладкомышечные клетки (МСГК) 64
5. Кроветворные стволовые клетки в пренатальном развитии 66
5.1. Происхождение КСК в эмбриональном развитии млекопитающих 66
5.2. Печень как основной кроветворный орган в пренатальном онтогенезе 73
5.2.1. Развитие кроветворения в печени 73
5.2.2. Кроветворное микроокружение эмбриональной печени и миграция кроветворных клеток в кроветворные органы в пренатальном развитии 75
5.2.3. Характеристика КСК из фетальной печени 80
Обсуждение результатов 173
Общее заключение 199
Выводы 204
Литература 207
