Введение
Глава 1 Обзор литературы 12
1.1 Общие механизмы ишемического и реперфузионного повреждения сердца 12
1.2 Роль свободно-радикальных процессов в ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда 14
1.3 Механизмы гибели кардиомиоцитов при ишемии и реперфузии 16
1.4 Современный взгляд на использование антиоксидантов для коррекции окислительного стресса 20
1.5 Фармакологические эффекты эмоксипина 22
1 .6 Возможность использования липосомальных препаратов при ишемических и реперфузионных повреждениях миокарда 25
Глава 2 Материал и методы исследования 29
2.Эксперименты на изолированном сердце 30
2.1.1 Схема эксперимента 30
2.1.2 Методика подготовки препарата изолированного сердца 31
2.1.3 Методика перфузии изолированного сердца методом Langendorff 32
2.1.4 Методика перфузии изолированного сердца методом Neely 33
2.1.5 Моделирование тотальной нормотермической ишемии 35
2.1.6 Методика оценки сократительной функции изолированного сердца 36
2.1.7 Характеристика регистрируемых параметров сократительной функции изолированного сердца 38
2.1.8 Методика оценки насосной функции изолированного сердца 39
2.1.9 Методика измерения коронарного протока изолированного сердца 40
2.2 Фармакологические агенты, используемые при выполнении исследования 40
2.2.1 Приготовление липосом 41
2.2.2Распределение животных по сериям экспериментов 42
2.3Биохимические методы исследования 43
2.3.1 Определение активности ферментов-маркеров повреждения миокарда 43
2.3.20пределение уровня свободнорадикальных процессов в миокарде 45
2.4Морфологический анализ кардиомиоцитов методом TUNEL 47
2.5Иммуноферментный анализ содержания оксида азота 49
2.6Статистическая обработка результатов 50
Глава 3 Результаты и обсуждение 51
3.1 Влияние введения «пустых» липосом 50 и 100 нм на ишемизированный и реперфузируемый миокард 51
3.2 Влияние введения липосом, содержащих 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл эмоксипина, на толерантность сердца к воздействию ишемии и реперфузии 56
3.2.1 Степень повреждения миокарда при реперфузии в условиях кардиопротекции 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формой эмоксипина 56
3.2.2 Антиоксидантные системы миокарда при тотальной ишемии и реперфузии при введении липосом, содержащих 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл эмоксипина 64
3.2.3 Коронарный кровоток ишемизированного миокарда в период реперфузии при введении 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина 68
3.2.3.1 Активность эндотелиальной NO-синтазы (по уровню стабильных метаболитов N0) после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина при тотальной нормотермической ишемии и реперфузии 71
3.2.3.2 Взаимосвязь выраженности свободнорадикальных процессов в миокарде, уровня NO и уровня коронарного протока реперфузируемого миокарда при введении липосомальной формы эмоксипина 74
3.2.4Сократительная функция миокарда в условиях тотальной нормотермической ишемии и реперфузии после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина 77
3.2.5 Насосная функция миокарда крыс в условиях тотальной нормотермической ишемии и реперфузии после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина 83
Глава 4 Заключение 87
Выводы 93
Список литературы 95
