Введение
ГЛАВА 1. Нормальная микрофлора и пробиотическая коррекция дисбиозов (обзор литературы) 19
1.1. Значение резидентной микрофлоры 19
1.2. Коррекция микроэкологических нарушений 25
1.3. Биологические свойства бактерий рода Lactobacillus 27
1.4. Возможные причины недостаточной эффективности пробиотической коррекции дисбиозов 40
1.5. О методах изучения взаимоотношений лактобацилл 53
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования 58
2.1. Материал 58
2.1.1. Микроорганизмы для микроэкологических исследований 58
2.1.2. Питательные среды 60
2.1.3. Экспериментальные животные 64
2.1.4. Антибиотики 64
2.1.5. Сорбирующие диски из картона 64
2.2. Методы исследования 65
2.2.1. Количественное определение и выделение чистой культуры кишечных лактобацилл 65
2.2.2. Количественное определение и выделение чистой культуры вагинальных лактобацилл 66
2.2.3. Количественное определение и выделение чистой культуры оральных лактобацилл 67
2.2.4. Идентификация лактобацилл 68
2.2.5. Получение «жидкого» пробиотика на основе лиофилизированных штаммов лактобацилл 73
2.2.6. Определение количества жизнеспособных лактобацилл в лиофилизированном препарате 74
2.2.7. Приготовление жидкого препарата резидентных лактобацилл и определение количества жизнеспособных клеток 74
2.2.8. Определение экзометаболитов лактобацилл 75
2.2.8.1 .Определение концентрации летучих жирных кислот 75
2.2.8.2. Определение способности лактобацилл к продукции перекиси водорода 77
2.2.8.3. Определение способности к кислотообразованию по Тернеру 79
2.2.8.4. Получение, фракционирование и изучение биологической активности фильтратов биомассы лактобацилл 79
2.2.9. Определение биосовместимости лактобацилл 80
2.2.10. Определение антагонистической активности лактобацилл в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий 82
2.2.11. Хранение штаммов лактобацилл 83
2.3. Экспериментальные модели кишечного лактодисбиоза 84
2.3.1. Тотальная лактодеконтаминация кишечника (ТДК) 84
2.3.2. Частичная лактодеконтаминация кишечника (ЧДК) 86
2.4. Статистическая обработка 86
ГЛАВА 3. Изучение биосовместимости и антагонизма лактобацилл 88
3.1. Количественный и видовой состав лактобацилл, изолированных от человека и экспериментальных животных 88
3.2. Экспериментальное обоснование выбора метода определения антагонизма лактобацилл 91
3.3. Взаимоотношения резидентных и пробиотических лактобацилл 96
3.4. Взаимоотношения между резидентными лактобациллами, изолированными от разных людей 108
3.5. Взаимоотношения лактобацилл, изолированных из разных биотопов у одного индивидуума 112
3.6. Взаимоотношения лактобацилл, принадлежащих к разным видам и штаммам 113
3.7. Взаимоотношения лактобацилл, изолированных от разных видов животных 116
3.7.1. Взаимоотношения резидентных лактобацилл матери и потомства у экспериментальных животных 118
3.8. Антагонизм лактобацилл в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов 123
3.9. Исследование экзометаболической активности резидентных и пробиотических лактобацилл 127
3.9.1. Продукция лактобациллами органических кислот и перекиси водорода 128
3.9.2. Исследование изо- и гомоантагонизма у пробиотических штаммов
лактобацилл 132
ГЛАВА 4. Экспериментальное исследование колонизации кишечника пробиотическими лактобациллами 139
4.1. Влияние пробиотиков на резидентную микрофлору здорового организма 139
4.2. Исследование колонизации пробиотическими лактобациллами тотально лактодеконтаминированного кишечника 148
4.3. Исследование колонизации пробиотическими лактобациллами
частично лактодеконтаминированного кишечника 159
ГЛАВА 5. Исследование биологической активности лиофилизированных и жидких препаратов пробиотических лактобацилл 168
5.1. Динамика накопления биомассы Lactobacillus acidophilus 317/402 при посеве лиофилизированной и жидкой культуры 169
5.2. Определение содержания летучих жирных кислот в «сухих» и «жидких» пробиотических препаратах 171
5.3. Исследования антагонистической активности лиофилизированного и жидкого препаратов пробиотических лактобацилл в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов 173
5.4. Исследование колонизационной активности лиофилизированного и жидкого препаратов гетеропробиотических лактобацилл на модели тотальной лактодеконтаминации кишечника 177
5.5. Исследование колонизационной активности лиофилизированного и жидкого препаратов гетеропробиотических лактобацилл на модели частичной лактодеконтаминации кишечника 186
ГЛАВА 6. Прикладные исследования, имеющие практическое значение 194
6.1. Способ получения жидкого лактобактерина на основе разных видов лактобацилл 194
6.2. Исследование скорости отмирания лактобацилл при хранении жидкого лактобактерина 199
6.3. Приготовление лактотампонов для применения в гинекологии 202
6.4. Оптимизация лиофильного высушивания пробиотических лактобацилл 204
Заключение 211
Выводы 222
Практические рекомендации 225
Список литературы 227
