Введение
5 Обзор литературы 9
5.1 Мезоглея и мезоглеальные клетки кишечнополостных 9
5.2 Зародышевые листки кишечнополостных 15
6 Материалы и методы 26
6.1 Сбор материала 26
6.2 Выделение РНК 26
6.3 Дифференциальный дисплей (ДД) 27
6.4 Выделение тотальной ДНК A. aurita 28
6.5 ПЦР на тотальной ДНК A. aurita 28
6.6 Обратнотранскриптазная ПЦР (ОТПЦР) 29
6.7 Флюоресцентная гибридизация in situ ЗО
6.8 Электрофоретическое разделение белков и их окрашивание в геле 32
6.9 Получение антител против рА47 33
6.10 Иммуноблот (Вестерн болот) 33
6.11 Иммуноцитохимия 33
6.12 Кислый-мочевинный электрофорез 34
6.13 Приготовление проб мезоглеина для MALDI и белкового секвенирования по Эдману 34
6.14 Клонирование мРНК мезоглеина 35
6.14.1 3 Rapid Amplification of cDNA Ends (ЗІІАСЕПЦР) . 35
6.14.2 бЯАСЕПЦР 36
6.15 Анализ экспрессии мезоглеина в эпидермисе, мезоглее и гастродерме методом ОТПЦР 37
6.16 Программное обеспечение 38
7 Результаты. 39
7.1 Поиск генов, дифференциально экспрессирующихся в мезоглее методом Дифференциального Дисплея 39
7.2 Выявление мажорного белка мезоглеи 45
7.3 Заряд мезоглеина и условия его экстракции из мезоглеи. 49
7.4 Молекулярное клонирование мРНК мезоглеина. 51
7.5 ОТПЦР мРНК мезоглеина 54
8 Обсуждение. 56
9 Выводы 60
10 Список литературы 61
