Введение
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 12
1.1. Ядерная оболочка 12
1.1.1. Строение и функция, ядерной оболочки 12
1.1.2. Ядерная оболочка и генетические заболевания человека 15
1,2 Ядерные поровые комплексы 17
1.2.1. Ультраструктура ядерных поровых комплексов 17
1.2.2. Биохимический состав ядерных пор 20
1.2.3. Механизмы транспорта молекул через ядерную пору 22
1.3. Эндоплазматический ретикулум и его связь с ядерной оболочкой 25
13.1. Структурная организация и функциональная роль эндоплазматического ретикулума в клетке 25
1.3.2. Формирование эндоплазматического ретикулума и его реорганизация при различных условиях 27
1.3.3. Миелиноподобные структуры 29
1.3.4. Пористые пластинки — компонент эндоплазматического ретикулума, содержащий цитоплазматические поры 30
1.3.4.1. Пористые пластинки- специфические органеллы высоко активных клеток....30
1.3.4.2. Взаимодействие пористых пластинок с внутриклеточными органеллами 31
1.3.4.3. Сравнительный анализ структурной организации и белкового состава пористых пластинок и ядерной оболочки 32
1.3.4.4. Возможные механизмы формирования цитошшматических пор 33
1.3.4.5. Возможная функциональная роль пористых пластинок в клетке 35
1.4. Механизмы сборки-разборки ядерных и цитоплазматических пор в митозе 36
1.4.1. Характеристика основных событий клеточного цикла 36
1.4.2. Динамика ядерной оболочки е процессе митоза 37
1.4.3. Реорганизация ядерных и цитоплазматических пор в клеточном цикле 40
1.5. Ооциты амфибий как удобная модель для изучения сборки ядерной оболочки в растущих
неделящихся клетках , 43
1.5.1. Особенности организации ооцитов амфибий и их отличие от других клеток 43
1.5.2. Характеристика различных стадий оогенезау амфибий 44
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 49
2.1. Объекты исследования и условия их содержания 49
2.2. Метод выделения ооцитов и микроинъекции в ооциты 49
2.3. Инкубация ооцитов с латруикулином . 50
2.4. Фиксация и окраска ооцитов для флуоресцентной и конфокальной микроскопии 50
2.5. Фиксация и заливка ооцитов для электронно-микроскопического анализа 51
2.6. Модификация метода фиксации и заливки ооцитов для выявления внутриядерных актиновых филаментов на ультраструктурном уровне 52
2.7. Получение, окрашивание и исследование полутошшх и ультратонких срезов 53
2.8. Морфометрический анализ электронно-микроскопических изображений 53
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.. 56
3,1. Особенности ультраструктурной организации ооцитов амфибий на разных стадиях оогепеза 56
3.1.1. Сравнительный анализ ультраструктурной организации ооцитов наразных стадиях оогеиеза 56
3.1.2. Динамика эндоплазматического ретикулума в развивающихся ооцитах амфибий: электронно-микроскопический и морфометрический анализ 62
3.1.3. Структурная организация и локализация миелиноподобных структур в цитоплазме ооцитов. Последовательные стадии декомпактизации миелиноподобных структур в мембраны гладкого эндоплазматического ретикулума 66
3.1.4, Морфология и динамика пористых пластинок в цитоплазме ооцитов амфибий 74
3.2, Динамика ядерной оболочки в процессе развития ооцитов 77
3.2.1. Структурная организация ядерной оболочки в растущих ооцитах амфибий 77
3.2.2. Сборка ядерной оболочки и ядерных поровых комплексов в процессе роста ооцитов амфибий 82
3.2.2.1. Ультраструктурная характеристика процесса сборки ядерной оболочки со стороны цитоплазмы 82
3.2.2.2. Ультраструктурная характеристика процесса сборки ядерной оболочки со стороны ядра 86
3.2.2.3. Нарушение сборки ядерной оболочки при инъекции в ооциты антител к нуклеопорину рб2 90
3.3. Взаимосвязь ядерной оболочки ооцитов ксенопуса с актин-содержащими компонентами
ядерного матрикса 92
3.3.1. Выявление внутриядерных актин-содержащих филаментов с помощью флуоресцентной и просвечивающей электронной микроскопии 92
3.3.2. Исследование влияния латрункулина, разрушающего актиновые филаменты, на ультраструктуру ооцита 98
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ 103
4.1, Участие мембранных компонентов цитоплазмы ооцита амфибий в сборке ядерной оболочки 1.03
4.1.1. Реорганизация и функциональная роль эндоплазматического ретикулума в развивающемся ооците 103
4.1.2. Миелиноподобные структуры как возможный источник мембран вранных ооцитах амфибий 107
4.1.3. Возможная роль пористых пластинок в формировании ядерной оболочки и модель взаимодействия этих внутриклеточных органелл 111
4.2, Новый механизм сборки ядерной оболочки в растущих неделящихся клетках 115
4.2.1, Сходство иразличия сборки ядерной оболочки вмитотически делящихся и
растущих неделящихся клетках 115
4.2.2. Сборка ядерной оболочки в ооцитах амфибий какмоделъ формирования ее
компонентов в интерфазных ядрах соматических клеток 119
4.3, Внутриядерный актин и его взаимосвязь с ядерной оболочкой 120
Заключение 124
Глава 5. ВЫВОДЫ 126
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 127
