Введение
Глава I. Обзор литературы 15
1.1. Преимплантационное развитие зародышей млекопитающих 15
1.2. Репродуктивная система животных, как среда для раннего развития и как мишень репродуктивных технологий 21
1.2.1. Репродуктивная система самцов в качестве индикатора влияния гормонально активных соединений 21
1.2.2. Репродуктивная система самок млекопитающих в связи с преимплантационными этапами развития зародышей 25
1.3. Раннее поснатальное развитие млекопитающих. Взаимодействие матери и новорожденных в период вскармливания 29
1.3.1. Изменение материнской среды в раннем постнаталыюм онтогенезе. Приемное воспитание 34
1.4. Изменение материнской среды в преимплантационный период: инструмент изучения онтогенеза млекопитающих и подход к сохранению генофонда 40
1.4.1. Трансплантация эмбрионов и базирующиеся на ней технологии в сельскохозяйственной биотехнологии 40
1.4.2. Межвидовая трансплантация эмбрионов: общий обзор в исторической ретроспективе 52
1.4.3. Межвидовая трансплантация и криоконсервация эмбрионов -как подход к сохранению исчезающих видов млекопитающих 53
1.4.3.1. Влияние комплекса процедур криоконсервации на состояние ядерной ДНК в различных клетках, а также на последующую судьбу эмбрионов, ооцитов и клеточных популяций 58
1.4.4. Репродуктивное клонирование в сочетании с трансплантацией эмбрионов - как метод сохранения исчезающих видов млекопитающих 60
1.4.5. Программа экстракорпорального оплодотворения; ее применение
в медицине и с целью сохранения исчезающих видов млекопитающих 63
1.5. Роль гормональной среды в раннем развитии млекопитающих 65
1.5.1. Эффекты воздействия гормонов на раннее развитие млекопитающих (преимплантационные эмбрионы и имплантация) 67
1.5.2. Влияние эстрадиола и ксеноэстрогенов на поздние этапы пренатального онтогенеза млекопитающих 73
1.5.3. Влияние эстрадиола и ксеноэстрогенов на формирующуюся репродуктивную систему в постнаталыюм онтогенезе млекопитающих 77
1.5.4. Использование гормональных препаратов при вызывании суперовуляции 80
1.5.5. Отдаленные эффекты гормональных воздействий 85
1.6. Европейская норка - исчезающий вид млекопитающих. Существующий статус и стратегии сохранения 87
1.6.1. Характеристика европейской норки в сравнении с другими видами куницеобразных 88
1.6.2. Причины исчезновения европейской норки 90
1.6.3. Сохранение европейской норки - достижения, проблемы и перспективы 91
1.7. Заключение по обзору литературы 93
ГЛАВА II. Материалы и методы 96
2.1. Экспериментальные животные и экспериментальные модели 96
2.1.1.Мыши 96
2.1.2. Крысы 96
2.1.3. Куницеобразные 103
2.2. Методы получения/трансплантации/криоконсервации эмбрионов 103
2.3. Методы оценки преимплантационных зародышей млекопитающих 110
2.3.1. Общие методы 110
2.3.2. Специальные методики при изучении и оценке эмбрионов мышей и крыс 111
2.3.2.1. Изготовление препаратов зародышей и их оценка 111
2.3.3. Специальные методики при изучении и оценке эмбрионов куницеобразных 112
2.3.3.1. Культивирование зародышей после криоконсервации 112
2.3.2.1. Инкубация с флюоресцентным красителем ФДА и последующей оценкой на люминисцентном микроскопе 113
2.4. Изучение отдаленных эффектов изменения гормональной среды в ходе раннего развития 113 2.4.1. Экзогенные гормональные воздействия в ходе преимплантациопного онтогенеза 113 2.4.2 .Методы оценки отдаленных эффектов после ранних гормональных воздействий 114
2.5. Изучение последствий изменения материнской среды в ходе преимплантационного (трансплантация эмбрионов) или постнатального (кросс-фостеринг) развития 117
2.5.1. Физиологические тесты 117
2.5.2. Поведенческие тесты 118
2.6. Статистическая обработка результатов 119
ГЛАВА III. Результаты исследования 120
3.1. Раннее развитие европейской норки и эмбриотехнологические подходы к сохранению этого исчезающего вида 120
3.1.1. Сравнительное изучение преимплантационного развития эмбрионов куницеобразиых: европейская норка, черный хорек и горностай 120
3.1.1.1. Европейская норка- преимплантациониое развитие бездиапаузы 120
3.1.1.2. Горностай - преимплантациониое развитие с облигатной диапаузой 122
3.1.1.3. Преимплантациониое развитие у черного хорька 124
3.1.1.4. Черный хорек - как «репродуктивная модель» европейской норки 125
3.1.2. Трансплантация эмбрионов куницеобразиых 126
3.1.2.1. Внутривидовая трансплантация эмбрионов на хорьках 126
3.1.2.2. Преодоление межвидового барьера. Хонорики и нохорики в качестве реципиентов при трансплантации эмбрионов от европейской
норки 130
3.1.3. Криоконсервация эмбрионов куницеобразиых 136
3.1.4. Суперовуляция у куницеобразиых 141 Резюме раздела 3.1 142
3.2. Влияние процедур криоконсервации на эмбрионы у
млекопитающих 144
3.2.1. Криоселекция при криоконсервации эмбрионов мышей 144
3.2.2. Криоселекция при криоконсервации эмбрионов крыс 145 Резюме раздела 3.2. 147
3.3. Онтогенетические и эмбриотоксические эффекты гонадотропных,
эстрогенных и ксеноэстрогенных воздействий на преимплантациониое
развитие млекопитающих in vivo 148
3.3.1. Применение стандартной суперовуляторной схемы как модель изменения гормональной среды в ходе раннего развития животных 148
3.3.2. Характер суперовуляции у половозрелых мышей в зависимости от собственного эндокринного статуса 150
3.3.3. Влияние эстрогенов, ксеноэстрогенов и гонадотропинов на развитие зародышей и их миграцию из яйцеводов в матку 152
3.3.4. Отдаленные эффекты на общее и половое развитие в период вскармливания 158
3.3.4.1. Демаскулинизация полового развития самцов Маскулинизация
самок. Уменьшение полового диморфизма 160
3.3.4.2. Ускорение полового созревания самок 162
3.3.5. Отдаленные эффекты на репродуктивный статус во взрослом состоянии 163
3.3.5.1. Отдаленные эффекты на репродуктивный статус взрослых самцов после воздействий эстрадиола или ксеноэстрогена МКХ на стадии преимплантационного зародыша 163
3.3.5.2. Отдаленные эффекты на репродуктивный статус взрослых самцов после воздействий эстрадиола или ксеноэстрогена МКХ на стадии имплантирующегося зародыша 166
3.3.5.3. Отдаленные эффекты на репродуктивный статус взрослых самок после воздействий эстрадиола или ксеноэстрогена МКХ на стадии преимплантационного зародыша 168
Резюме раздела 3.3 171
3.4. Физиологические и поведенческие эффекты изменения материнской среды в раннем пренаталыюм/ раннем постнатальном развитии млекопитающих 172
3.4.1. Последствия изменений материнской среды в раннем пренаталыюм онтогенезе для формирования гипертензивного фенотипа у крыс НИСАГ 172
3.4.2. Обратное влияние трансплантации эмбрионов и/или приемного воспитания на приемную мать 177
3.4.3. Изменение материнской среды во время постнатального развития крыс ГК: отдаленные эффекты приемного воспитания 182
Резюме раздела 3.4 184
ГЛАВА IV. Обсуждение результатов 186
4.1. Эффекты изменения материнской среды (криоконсервация, гормоны) па развивающиеся in vivo эмбрионы млекопитающих 186
4.2. Особенности раннего развития европейской норки в сравнении с горностаем и хорьком 193
4.3. Особенности применения метода трансплантации эмбрионов у куницеобразных 197
4.4. Криоконсервация зародышей куницеобразных 202
4.5. Последствия изменения гормональной среды во время преимплантационного развития in vivo (экзогенные эстрогены, ксеноэстрогеиы, гонадотропины) для дальнейшего онтогенеза млекопитающих 207
4.6. Влияние трансплантации эмбрионов и приемного воспитания на проявление генетически обусловленных признаков. Роль материнской среды в формировании гипертензивного фенотипа у крыс НИСАГ и
каталептическогофенотипа у крыс ГК 216
Заключение 228
Выводы 230
Список литературы
