Введение
Перечень использованных сокращений и терминов 5
Введение 7
1. Обзор литературы. Эпигенетические, молекулярно-генетические и биохимические аспекты развития нарушений эмбриогенеза человека 14
1.1. Обзор патологических процессов, сопряженных с нарушениями эмбрионального развития человека 14
1.1.1. Комплекс состояний материнского организма, представляющих угрозу внутриутробному развитию плода 15
1.1.2. Гипергомоцистеинемия как фактор риска развития нарушений эмбриогенеза человека 21
1.1.3. Патология плаценты, сопутствующая нарушениям раннего онтогенеза человека 26
1.2. Обзор диагностических маркеров патологии раннего онтогенеза человека 31
1.2.1. Биохимические показатели в оценке развития плода 31
1.2.2. Молекулярно-генетические маркеры в диагностике состояния плода 36
1.2.3. Эпигенетические факторы в оценке состояния плода 50
2. Материал и методы исследования 54
2.1. Материал исследования 54
2.1.1. Материал для биохимических исследований 54
2.1.2. Материал для молекулярно-генетических исследований 55
2.1.3. Материал для эпигенетических исследований 56
2.2. Методы исследований 56
2.2.1. Иммуноферментный анализ концентрации гомоцистеина в сыворотке крови 56
2.2.2. Микробиологический тест определения содержания фолиевой кислоты в крови 57
2.2.3. Молекулярно-генетические методы исследований полиморфизмов генов фолатного обмена 57
2.2.4. Эпигенетические методы исследования уровня метилирования генов 59
2.2.5. Статистические методы 65
2.2.6. Контроль качества проводимых исследований 68
3. Результаты и их обсуждение 69
3.1. Результаты исследования биохимических и молекулярно-генетических показателей фолатного обмена при различном течении эмбриогенеза человека 69
3.1.1. Определение диапазонов содержания гомоцистеина и фолиевой кислоты у небеременных и беременных женщин Ростовской области 70
3.1.2. Изучение роли гомоцистеина и фолиевой кислоты в развитии широкого спектра нарушений раннего онтогенеза человека 76
3.1.3. Определение частот аллелей и генотипов генов фолатного обмена у представительниц ростовской популяции 82
3.1.4. Оценка роли совокупного присутствия аномальных биохимических показателей и полиморфизмов генов фолатного обмена в развитии нарушений эмбриогенеза человека 85
3.2. Результаты исследования уровней метилирования плацентарных генов при различном течении эмбриогенеза человека 88
3.2.1. Оценка степени контаминации образцов тканей 91
3.2.2. Статус метилирования генов, вовлеченных в процессы развития и формирования плаценты, в хорионической и децидуальной тканях 93
3.2.3. Результаты исследования уровня глобального метилирования ДНК в хорионической и децидуальной тканях 101
3.2.4. Статус метилирования генов, вовлеченных в процессы развития и формирования плаценты, и уровень глобального метилирования ДНК в крови 102
3.2.5. Результаты глубокого бисульфитного секвенирования исследуемых генов в плацентарных тканях 104
Заключение 107
Выводы 109
Практические рекомендации 110
Список использованных источников 112
Приложение 144
